1．Graves?。℅D）可導致甲狀腺功能亢進。研究發(fā)現(xiàn)，GD患者甲狀腺細胞表面表達大量細胞間黏附分子1（ICAM1），導致甲狀腺腫大?？蒲腥藛T通過制備單克隆抗體，對治療GD進行了嘗試。
（1）用ICAM1作為抗原間隔多次免疫若干只小鼠，幾周后取這些免疫小鼠的血清，分別加入多孔培養(yǎng)板的不同孔中，多孔培養(yǎng)板中需加入 以檢測這些小鼠產(chǎn)生的抗體。依據(jù)反應結(jié)果，選出抗原—抗體反應最 （填“強”或“弱”）的培養(yǎng)孔所對應的小鼠M。
（2）取小鼠M的脾臟細胞制成細胞懸液，與實驗用骨髓瘤細胞進行融合，用選擇培養(yǎng)基篩選得到具有 能力的細胞。核酸合成有兩個途徑，物質(zhì)A可以阻斷其中的全合成途徑（如圖）。正常細胞內(nèi)含有補救合成途徑所必需的轉(zhuǎn)化酶和激酶，制備單克隆抗體時選用的骨髓瘤細胞中缺乏轉(zhuǎn)化酶?？捎眉尤際、A、T三種物質(zhì)的“HAT培養(yǎng)基”篩選出特定的雜交瘤細胞。

融合前將部分培養(yǎng)細胞置于含HAT的選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng)，一段時間后培養(yǎng)基中 （填“有”或“無”）骨髓瘤細胞生長，說明培養(yǎng)基符合實驗要求。雜交瘤細胞可以在HAT培養(yǎng)基上大量增殖的原因是 。
（3）將獲得的上述細胞在多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，用ICAM1檢測，從中選擇 的雜交瘤細胞，將其植入小鼠腹腔中進行克隆培養(yǎng)，一段時間后從小鼠腹水中提取實驗用抗體。

2．回答下列（一）、（二）小題：
（一）下面是某生物興趣小組同學配制的培養(yǎng)基，將馬鈴薯去皮切塊，加水煮沸一定時間，過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂，用水定容后滅菌，得到M培養(yǎng)基?；卮鹣铝袉栴}：
（1）在馬鈴薯浸出液中含有微生物生長所需的水、碳源、、生長因子等，向馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖的原因是 。
（2）若用M培養(yǎng)基分離酵母菌或霉菌，需要在培養(yǎng)基中加入青霉素，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，加入青霉素能分離酵母菌和霉菌的機理是 。
（3）若用M培養(yǎng)基分離土壤中能分解纖維素的微生物，需要用 替代M培養(yǎng)基中的碳源，同時要加入剛果紅染料，已知剛果紅可以與纖維素形成紅色復合物，但并不和纖維素水解后的生成物發(fā)生這種反應。接種土壤浸出液后，經(jīng)培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以這些細菌為中心的透明圈，產(chǎn)生透明圈的原因是 。
（4）若用M培養(yǎng)基生產(chǎn)谷氨酸，需要調(diào)整培養(yǎng)基中的碳氮比，研究發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)基碳氮比為4：1時，菌體大量繁殖，谷氨酸積累 ；當培養(yǎng)基碳氮比為3：1時，菌體繁殖受到抑制，谷氨酸產(chǎn)量則 。
（二）單克隆抗體被廣泛用作診斷試劑，在多種疾病的診斷和病原體鑒定中發(fā)揮重要的作用。如圖是單克隆抗體制備示意圖，結(jié)合相關(guān)知識回答下列問題：

（5）過程①加的促融劑是 ，只考慮兩兩融合則①有 種融合形式。
（6）在HAT培養(yǎng)基中能生存的細胞是 ，該培養(yǎng)基為 。
（7）過程③用96孔板培養(yǎng)和篩選雜交瘤細胞，具體方法是 ，篩選的原理是 ，篩選的結(jié)果是既能產(chǎn)生特異性抗體，又能無限繁殖的雜交瘤細胞。
（8）單克隆抗體的最大優(yōu)點是 （答出一點即可）。若制備能診斷新冠病毒的單克隆抗體診斷試劑盒，則注射抗原A為 。

3．常見的探針有核酸探針和蛋白質(zhì)探針。兩種探針結(jié)構(gòu)和功能均不相同，故而應用在不同的檢測中。而兩種探針的制備過程中所應用的技術(shù)也不相同。請回答下列問題。
Ⅰ、蛋白質(zhì)探針的制備。
（1）蛋白質(zhì)探針常用 技術(shù)來制備。該技術(shù)的基本流程是將 注射給實驗動物，獲取的脾細胞與骨髓瘤細胞融合后，用HAT培養(yǎng)基篩選培養(yǎng)對象。該篩選過程得到的雜交瘤細胞是產(chǎn)生 的雜交瘤細胞，接下來要經(jīng)過 檢測來獲得產(chǎn)生特定蛋白的雜交瘤細胞。最終將純化得到的特定蛋白結(jié)合上熒光或放射性標記，即為蛋白質(zhì)探針。
（2）上述HAT培養(yǎng)基是 （填“液體”或“固體”）培養(yǎng)基。融合成雜交瘤細胞后再檢測尋找產(chǎn)生特定目標蛋白的雜交瘤細胞，而不直接在脾細胞中尋找產(chǎn)生特定蛋白的B淋巴細胞的原因是 。
Ⅱ、不對稱PCR是利用不等量的一對引物來產(chǎn)生大量單鏈DNA（ssDNA）的方法。該方法制備的ssDNA結(jié)合上熒光或放射性標記，即為核酸探針。

（3）不對稱PCR中加入的一對引物中含量較少的被稱為限制性引物，含量較多的被稱為非限制性引物。兩者的比例通常為1：100。PCR反應的最初的若干次循環(huán)中，其擴增產(chǎn)物主要是雙鏈DNA（dsDNA），但當限制性引物消耗完后，就會產(chǎn)生大量的ssDNA。據(jù)下圖可知，最后大量獲得的ssDNA是圖中的 （填“甲”或“乙”）鏈。
（4）若反應最初有a個模板DNA分子，最初的6次循環(huán)擴增產(chǎn)生dsDNA，后10個循環(huán)均只擴增ssDNA，則需要限制性引物 個。請繪制這16個循環(huán)中ssDNA的分子數(shù)量隨循環(huán)次數(shù)的變化圖2。（說明：縱軸的刻度請自行標注。）