自然界中某些細(xì)菌可通過代謝將原油轉(zhuǎn)化為穩(wěn)定無害的終產(chǎn)物,科學(xué)家為獲得能有效修復(fù)原油污染土壤的工程菌展開相關(guān)研究。
(1)獲得能降解原油的目標(biāo)菌可從
原油污染土壤
原油污染土壤
取樣,樣品經(jīng)無菌水
無菌水
(無菌水/蒸餾水)稀釋后涂布于以原油為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng),分離純化后獲得目標(biāo)菌A。
(2)目標(biāo)菌A成膜性差,不能有效控制原油向深層土壤滲透。研究人員將假單胞菌的bdlA基因(約1300bp)導(dǎo)入目標(biāo)菌A體內(nèi),嘗試構(gòu)建成膜性好的工程菌。
①假單胞菌遭受環(huán)境壓力時,會分泌大量胞外復(fù)合物將自身包裹于其中形成細(xì)菌聚集膜樣物(生物被膜),體現(xiàn)了生物對環(huán)境的適應(yīng)
適應(yīng)
。
②圖1為bdlA基因與pX系列質(zhì)粒連接構(gòu)建的重組質(zhì)粒模式圖,為初步檢測構(gòu)建是否成功,可選用限制酶Csp45I、XbaI
Csp45I、XbaI
對其切割,并對酶切產(chǎn)物及重組質(zhì)粒進(jìn)行凝膠電泳檢測,結(jié)果如圖2。據(jù)圖2可初步判斷重組質(zhì)粒構(gòu)建成功,依據(jù)是連接到兩個質(zhì)粒上的目的基因一致
連接到兩個質(zhì)粒上的目的基因一致
。
(3)上述方法獲得的兩種工程菌命名為KT2和KT5,在不同時間測定實(shí)驗(yàn)組中工程菌及對照組中導(dǎo)入普通質(zhì)粒的目標(biāo)菌A
導(dǎo)入普通質(zhì)粒的目標(biāo)菌A
的生物被膜總量相對值,結(jié)果如圖3所示。該結(jié)果表明在36t/h時KT2和KT5兩種工程菌的生物被膜量相對值顯著提高
在36t/h時KT2和KT5兩種工程菌的生物被膜量相對值顯著提高
。
(4)若要將以上工程菌用于原油污染土壤的修復(fù),舉一例說明下一步還應(yīng)進(jìn)行哪些方面的研究如何擴(kuò)大培養(yǎng)
如何擴(kuò)大培養(yǎng)
?