新型冠狀病毒的檢測(cè)方法分為抗體檢測(cè)和核酸檢測(cè),核酸檢測(cè)主要采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)法。qPCR法檢測(cè)新型冠狀病毒的基本過(guò)程如圖所示,回答下列問(wèn)題:
(1)PCR即多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù),該技術(shù)的原理是 DNA雙鏈復(fù)制(或DNA復(fù)制)DNA雙鏈復(fù)制(或DNA復(fù)制)。PCR反應(yīng)的條件包括 Taq酶(耐高溫的DNA聚合酶)、引物Taq酶(耐高溫的DNA聚合酶)、引物、四種脫氧核苷酸、一定的緩沖液和DNA模板。PCR反應(yīng)每次循環(huán)依次經(jīng)歷 變性、復(fù)性、延伸變性、復(fù)性、延伸三個(gè)環(huán)節(jié)。
(2)滅活的新型冠狀病毒RNA逆轉(zhuǎn)錄為DNA的過(guò)程中,需要 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄酶參與。
(3)qPCR法是基于熒光物質(zhì)實(shí)時(shí)檢測(cè)DNA含量的方法,該方法是在PCR反應(yīng)體系中,加入的熒光探針與模板DNA(逆轉(zhuǎn)錄出的新冠病毒的DNA)的某條鏈互補(bǔ)結(jié)合,當(dāng)合成的子鏈延伸至探針處,探針被酶切降解,熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)就會(huì)接收到熒光信號(hào)。據(jù)此分析,根據(jù)檢測(cè)結(jié)果如何初步判定待測(cè)者是否感染新型冠狀病毒?若檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)熒光,則說(shuō)明待測(cè)者感染了新型冠狀病毒,否則沒(méi)有感染若檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)熒光,則說(shuō)明待測(cè)者感染了新型冠狀病毒,否則沒(méi)有感染。
(4)科學(xué)家嘗試用新型冠狀病毒的S蛋白基因?yàn)槟康幕颍没蚬こ碳夹g(shù)以大腸桿菌來(lái)生產(chǎn)S蛋白,作為重組蛋白疫苗的材料,請(qǐng)寫(xiě)出該方法生產(chǎn)S蛋白的基本過(guò)程:獲取S蛋白基因→構(gòu)建基因表達(dá)載體→將S蛋白基因?qū)氪竽c桿菌細(xì)胞→S蛋日基因的檢測(cè)與鑒定→生產(chǎn)、提取S蛋白獲取S蛋白基因→構(gòu)建基因表達(dá)載體→將S蛋白基因?qū)氪竽c桿菌細(xì)胞→S蛋日基因的檢測(cè)與鑒定→生產(chǎn)、提取S蛋白。(用文字和箭頭的形式表示)
【答案】DNA雙鏈復(fù)制(或DNA復(fù)制);Taq酶(耐高溫的DNA聚合酶)、引物;變性、復(fù)性、延伸;逆轉(zhuǎn)錄;若檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)熒光,則說(shuō)明待測(cè)者感染了新型冠狀病毒,否則沒(méi)有感染;獲取S蛋白基因→構(gòu)建基因表達(dá)載體→將S蛋白基因?qū)氪竽c桿菌細(xì)胞→S蛋日基因的檢測(cè)與鑒定→生產(chǎn)、提取S蛋白
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:6引用:3難度:0.7
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1.數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對(duì)定量技術(shù),其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是( ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:6引用:2難度:0.6 -
2.PCR技術(shù)不僅可以擴(kuò)增目的基因,還可用于定點(diǎn)誘變目的基因等。大引物PCR就是一種定點(diǎn)突變技術(shù)。大引物PCR需要用到引物進(jìn)行兩次PCR,其操作步驟為:
①根據(jù)目的基因序列設(shè)計(jì)引物,得到兩個(gè)常規(guī)引物,分別為常規(guī)上游引物和常規(guī)下游引物;
②根據(jù)突變堿基所處序列位置設(shè)計(jì)突變上游引物,突變位點(diǎn)位于突變引物序列的中間位置
③由突變上游引物與常規(guī)下游引物進(jìn)行第一次PCR反應(yīng)得到下游大引物;
④用得到的下游大引物中和另一個(gè)常規(guī)上游引物進(jìn)行第二次PCR擴(kuò)增,得到突變目的基因序列?;卮鹣铝袉?wèn)題:
(1)PCR擴(kuò)增的第一步是使雙鏈模板DNA變性。DNA中G+C的含量與變性要求的溫度有關(guān),DNA中G+C的含量越多,要求的變性溫度越高。其原因是
(2)在第一次PCR反應(yīng)中,形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過(guò)
(3)如果要利用微生物進(jìn)一步克隆PCR定點(diǎn)誘變產(chǎn)物,其步驟包括:發(fā)布:2024/12/30 23:0:2組卷:32引用:3難度:0.6 -
3.下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說(shuō)法錯(cuò)誤的是( ?。?/h2>
發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:3引用:3難度:0.7
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