Anti基因是小型豬器官表面抗原基因，人工合成的reAnti基因的模板鏈與Anti基因的模板鏈互補。科學家利用合成的reAnti基因培育出轉基因克隆豬，用于解決人類器官移植時免疫排斥。
（1）利用PCR技術對reAnti基因進行擴增，其原理是

DNA雙鏈復制

DNA雙鏈復制

，在構建基因表達載體時，用兩種不同的限制酶切割reAnti基因和運載體DNA來獲得不同的黏性末端，原因是

防止目的基因和運載體DNA自身環(huán)化和反向連接（使目的基因定向連接到運載體上）

防止目的基因和運載體DNA自身環(huán)化和反向連接（使目的基因定向連接到運載體上）

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（2）豬胎兒成纖維細胞培養(yǎng)過程中，需要用

胰蛋白酶（膠原蛋白酶）

胰蛋白酶（膠原蛋白酶）

酶將組織分散成細胞懸液。培育轉基因豬時，應使用

顯微注射

顯微注射

技術將含有reAnti基因的表達載體導入豬成纖維細胞。再將該轉基因豬的細胞核注入

減數(shù)第二次分裂中期

減數(shù)第二次分裂中期

時期的卵母細胞中，構建重組胚胎。
（3）胚胎培養(yǎng)液中除了一些無機鹽和有機鹽外，還需要添加“兩酸、兩素”以及動物血清，其中的“兩酸”是指

氨基酸和核苷酸

氨基酸和核苷酸

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（4）用

DNA分子雜交

DNA分子雜交

技術檢測出轉基因克隆豬的細胞核DNA中含有reAnti基因，但器官表面不含有抗原，原因是

reAnti基因抑制了Anti基因的翻譯過程，不能合成相應的抗原（reAnti基因轉錄出的mRNA與Anti基因轉錄出的mRNA形成了雙鏈，不能翻譯合成相應的抗原）

reAnti基因抑制了Anti基因的翻譯過程，不能合成相應的抗原（reAnti基因轉錄出的mRNA與Anti基因轉錄出的mRNA形成了雙鏈，不能翻譯合成相應的抗原）

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