科學家發(fā)現(xiàn)細菌中存在清除入侵病毒DNA的功能系統(tǒng)，并發(fā)明了CRISPR/Cas9介導的基因組編輯技術，即CRISPR/Cas9系統(tǒng)的Cas9蛋白在gRNA引導下，與靶基因特定序列結合并將DNA雙鏈切斷，實現(xiàn)對基因組定點編輯（如圖1）。請回答：

（1）從功能上來看，CRISPR/Cas9系統(tǒng)相當于基因工程中的
限制性核酸內切（限制酶）
限制性核酸內切（限制酶）
酶，該系統(tǒng)廣泛存在于細菌中，可推測其在細菌中的作用是
切割外源DNA，使之失效，起到保護自身的目的（或抵抗外源DNA的入侵，保護自身或清除入侵病毒DNA的功能）
切割外源DNA，使之失效，起到保護自身的目的（或抵抗外源DNA的入侵，保護自身或清除入侵病毒DNA的功能）
。
（2）通過誘發(fā)Cas9基因突變，可獲得只切割靶基因一條鏈的nCas9蛋白。將nCas9蛋白與胞嘧啶脫氨酶融合，能夠對靶位點進行單堿基編輯，實現(xiàn)C→T（G→A）的堿基替換（如圖2）。如果要修正由一對堿基對改變引起的致病基因，可用圖中的
②或③或②和③
②或③或②和③
途徑（從①②③中選擇）。圖2中靶基因復制后得到的基因中目的基因占
50
50
%。
（3）現(xiàn)通過一些技術讓Cas9基因發(fā)生突變，使Cas9蛋白失去切割活性，可將CRISPR/Cas9技術用于抑制基因轉錄，該技術能實施的過程可能是：在gRNA的引導下，Cas9蛋白與靶基因的
啟動子
啟動子
結合，使
RNA聚合酶
RNA聚合酶
失去結合位點從而抑制靶基因的轉錄。

【答案】限制性核酸內切（限制酶）；切割外源DNA，使之失效，起到保護自身的目的（或抵抗外源DNA的入侵，保護自身或清除入侵病毒DNA的功能）；②或③或②和③；50；啟動子；RNA聚合酶

【解答】

【點評】

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