一種天然蛋白t-PA能高效降解因血漿纖維蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和腦血栓的急救藥，但是心梗患者注射大劑量的t-PA會誘發(fā)顱內出血。研究證實，將t-PA蛋白第84位的半胱氨酸換成絲氨酸，能顯著降低其誘發(fā)出血的副作用。據此，先對天然t-PA基因的堿基序列進行改造，然后再采取傳統(tǒng)的基因工程方法表達該改造后的基因，可制造出性能優(yōu)異的改良t-PA蛋白（注：如圖表示相關的目的基因、載體及限制酶。pCLY11為質粒）。請回答下列問題：
（1）利用以上技術制造出性能優(yōu)異的改良t-PA蛋白的過程被稱為 蛋白質蛋白質工程。
（2）DNA重組技術中所選用的質粒載體應具有以下特征：質粒DNA分子上有復制原點，可以保證質粒在受體細胞中能 自我復制自我復制；質粒DNA分子上有 一至多個限制酶切位點一至多個限制酶切位點，便于外源DNA插入；質粒DNA分子上有 有標記基因（某種抗生素抗性基因）有標記基因（某種抗生素抗性基因），便于篩選出含質粒載體的宿主細胞。
（3）擬改造t-PA基因，須先獲取t-PA基因。若從cDNA文庫中獲取上t-PA基因，則從CDNA文庫中獲取的t-PA基因 不含不含（填“含有”或“不含”）內含子序列。已知t-PA基因比較小，且堿基序列已經測出，也可以通過 化學合成（人工合成）化學合成（人工合成）方法獲取t-PA基因。已知t-PA第84位的半胱氨酸對應的模板鏈堿基序列為ACA，絲氨酸的密碼子為UCU。則改造后的t-PA基因第84位的絲氨酸對應的模板鏈堿基序列應設計為 AGAAGA。
（4）若改造后的t-PA基因的粘性末端如上圖所示，則需要選用限制酶 XmaⅠXmaⅠ和 BelⅡBelⅡ切割質粒pCLY11，才能保證質粒與t-PA改良基因高效連接。改良基因與質粒pCLY11構建基因表達載體時，需要 DNA連接酶DNA連接酶酶催化，該酶催化形成 磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵鍵。
（5）以大腸桿菌作為受體細胞，在含新霉素的培養(yǎng)基中形成菌落的受體細胞并非都是目的菌株，原因是 導入未連目的基因的質粒的大腸桿菌也可以在這種培養(yǎng)基上生長導入未連目的基因的質粒的大腸桿菌也可以在這種培養(yǎng)基上生長。這時需選擇呈 白白色的菌落，進一步培養(yǎng)檢測和鑒定，以選育出能生產改良t-PA蛋白的工程菌株。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】蛋白質；自我復制；一至多個限制酶切位點；有標記基因（某種抗生素抗性基因）；不含；化學合成（人工合成）；AGA；XmaⅠ；BelⅡ；DNA連接酶；磷酸二酯鍵；導入未連目的基因的質粒的大腸桿菌也可以在這種培養(yǎng)基上生長；白
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：17引用：1難度：0.6
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7
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