乳鐵蛋白屬于轉(zhuǎn)鐵蛋白,是乳汁中主要的鐵結(jié)合蛋白,具有免疫以及參與調(diào)節(jié)鐵代謝和細胞生長等功能。由于人乳的來源有限,不可能通過直接提取的方法來大量獲得人乳鐵蛋白,所以科研人員將人乳鐵蛋白基因進行異源表達(在其他生物體的組織細胞中表達)?;卮鹣铝袉栴}:
(1)科研人員首先從人體的 乳腺乳腺組織細胞中獲取乳鐵蛋白的mRNA,并通過 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄獲得乳鐵蛋白的cDNA,該cDNA不含內(nèi)含子的原因是 成熟的mRNA中不含內(nèi)含子的轉(zhuǎn)錄區(qū)段(mRNA在加工過程中切除了內(nèi)含子的轉(zhuǎn)錄區(qū)段)成熟的mRNA中不含內(nèi)含子的轉(zhuǎn)錄區(qū)段(mRNA在加工過程中切除了內(nèi)含子的轉(zhuǎn)錄區(qū)段)。
(2)將獲得的人乳鐵蛋白的cDNA采用PCR技術(shù)進行大量擴增。PCR擴增乳鐵蛋白基因的前提是 已知一段乳鐵蛋白基因的核苷酸序列已知一段乳鐵蛋白基因的核苷酸序列,PCR每次循環(huán)可分為 變性、復(fù)性和延伸變性、復(fù)性和延伸三步。PCR反應(yīng)所需的酶是 熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)。
(3)在人乳鐵蛋白基因與質(zhì)粒構(gòu)建成的基因表達載體中,為了控制人乳鐵蛋白基因轉(zhuǎn)錄,在該基因的前后端應(yīng)分別構(gòu)建 啟動子、終止子啟動子、終止子等元件。通過顯微注射法將基因表達載體導(dǎo)入小鼠的睪丸中,將該小鼠與正常母鼠交配獲得陽性(含目的基因)子代,陽性子代中只有一半能產(chǎn)生人乳鐵蛋白,原因可能是 陽性子代中只有雌性個體能產(chǎn)生人乳鐵蛋白陽性子代中只有雌性個體能產(chǎn)生人乳鐵蛋白。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定.
【答案】乳腺;逆轉(zhuǎn)錄;成熟的mRNA中不含內(nèi)含子的轉(zhuǎn)錄區(qū)段(mRNA在加工過程中切除了內(nèi)含子的轉(zhuǎn)錄區(qū)段);已知一段乳鐵蛋白基因的核苷酸序列;變性、復(fù)性和延伸;熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶);啟動子、終止子;陽性子代中只有雌性個體能產(chǎn)生人乳鐵蛋白
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:7引用:4難度:0.7
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