RBD是新型冠狀病毒表面囊膜S蛋白的受體結(jié)合域肽段。Fc為人源抗體IgGⅠ的部分重鏈，能通過二硫鍵相結(jié)合形成Fc二聚體?？蒲腥藛T為研制重組蛋白疫苗，構(gòu)建了融合表達(dá)RBD和Fc的重組質(zhì)粒。實(shí)驗(yàn)流程圖如圖，請回答下列問題。
（1）通過重疊延伸PCR（重疊鏈相互搭橋、互為模板而延伸，最終將不同來源的DNA片段拼接起來）獲取融合基因。
①第一次PCR中，至少經(jīng) 22次擴(kuò)增，可得到末端平齊且含引物2的產(chǎn)物；擴(kuò)增n次后，末端平齊且含引物2的DNA分子數(shù)量為 2n-n-12n-n-1個(gè)；
②第二次PCR擴(kuò)增表達(dá)Fc的DNA片段；
③經(jīng)第三次PCR獲取融合基因，第三次PCR比第一次PCR延伸所需時(shí)間 長長（選填“長”或“短”），原因是 第三次PCR中待擴(kuò)增的片段長第三次PCR中待擴(kuò)增的片段長。
（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體
| 分步實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/td> | 簡易操作 |
| 酶切融合基因和質(zhì)粒pCDNA3.1 | 37℃條件下，酶切8小時(shí)，電泳鑒定、回收；酶切位點(diǎn)應(yīng)添加在引物① 1和4 1和4 的末端。（填引物種類） |
| 獲取重組質(zhì)粒 | 將上述融合基因、質(zhì)粒和② DNA連接 DNA連接 酶一起加入反應(yīng)體系，16℃反應(yīng)過夜。 |
| 利用大腸桿菌③ 擴(kuò)增重組質(zhì)粒 擴(kuò)增重組質(zhì)粒 |
將產(chǎn)物加入感受態(tài)大腸桿菌培養(yǎng)液，培養(yǎng)過夜，提取更多重組質(zhì)粒。 |
使重組DNA進(jìn)入受體細(xì)胞
使重組DNA進(jìn)入受體細(xì)胞
。（4）已知RBD二聚體疫苗比RBD單體疫苗效果更優(yōu)，推斷重組蛋白中Fc的作用是
有效介導(dǎo)RBD二聚體的形成
有效介導(dǎo)RBD二聚體的形成
。【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合；DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定．
【答案】2；2n-n-1；長；第三次PCR中待擴(kuò)增的片段長；1和4；DNA連接；擴(kuò)增重組質(zhì)粒；使重組DNA進(jìn)入受體細(xì)胞；有效介導(dǎo)RBD二聚體的形成
【解答】
【點(diǎn)評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：33引用：1難度：0.6
相似題
-
1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
把好題分享給你的好友吧~~