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為增加油菜種子的含油量,研究人員嘗試將陸地棉的酶D基因與擬南芥葉綠體膜上的轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因相連,導(dǎo)入油菜葉片細(xì)胞并獲得了轉(zhuǎn)基因油菜品種。
(1)從陸地棉基因文庫中獲取酶D基因,一般用PCR技術(shù)擴(kuò)增,PCR擴(kuò)增過程中,需加熱至90?95℃,其目的是
使雙鏈DNA解聚為單鏈
使雙鏈DNA解聚為單鏈
;加熱至70?75℃時(shí),互補(bǔ)鏈可在
熱穩(wěn)定DNA聚合(或Taq)
熱穩(wěn)定DNA聚合(或Taq)
酶的作用下延伸。
(2)如圖甲,選用限制酶
CiaⅠ
CiaⅠ
處理兩個(gè)基因后再用
DNA連接
DNA連接
酶處理,得到
A、D
A、D
(填圖中字母)端相連的融合基因。
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(3)將上述融合基因插入圖乙所示Ti質(zhì)粒的T一DNA中,構(gòu)建
基因表達(dá)載體
基因表達(dá)載體
并導(dǎo)入農(nóng)桿菌中。將獲得的農(nóng)桿菌接種在含
四環(huán)素
四環(huán)素
(填“氨芐青霉素”、“卡那霉素”、“四環(huán)素”或“鏈霉素”等抗生素)的固體平板上培養(yǎng)得到單菌落,再利用液體培養(yǎng)基振蕩培養(yǎng),得到用于轉(zhuǎn)化的侵染液。
(4)剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時(shí)間,此過程的目的是
將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
,進(jìn)一步篩選后獲得轉(zhuǎn)基因油菜。
(5)在分子水平上,用
抗原-抗體雜交
抗原-抗體雜交
方法檢驗(yàn)融合基因是否表達(dá)成功。

【答案】使雙鏈DNA解聚為單鏈;熱穩(wěn)定DNA聚合(或Taq);CiaⅠ;DNA連接;A、D;基因表達(dá)載體;四環(huán)素;將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞;抗原-抗體雜交
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:3引用:3難度:0.6
相似題
  • 1.PCR又稱聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),在基因工程中常用它特異性地快速擴(kuò)增目的基因。下列有關(guān)PCR的敘述錯(cuò)誤的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/10/26 8:30:1組卷:18引用:2難度:0.6
  • 2.“微衛(wèi)星DNA”是一類廣泛分布于真核生物核DNA中的簡單重復(fù)序列,以1~6個(gè)核苷酸為基本單位,重復(fù)次數(shù)在不同個(gè)體和品種間有較大可變性,可作為一種標(biāo)記對(duì)基因進(jìn)行定位。
    (1)由于兩側(cè)序列高度保守,可利用PCR技術(shù)對(duì)重復(fù)次數(shù)不同的微衛(wèi)星DNA加以鑒定,如圖1.請(qǐng)?jiān)诜娇蛑醒a(bǔ)充C組PCR產(chǎn)物電泳結(jié)果的大致位置。
     

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    (2)研究人員以純種紫心大白菜為父本、純種非紫心大白菜為母本進(jìn)行雜交,F(xiàn)1自交后共收獲F2植株330株,其中紫心245株,非紫心85株。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明
     
    是顯性性狀,推測(cè)相關(guān)基因的傳遞符合
     
    定律。
    (3)為了對(duì)大白菜的紫心基因進(jìn)行有效標(biāo)記和定位,研究人員針對(duì)已知的微衛(wèi)星標(biāo)記A710兩側(cè)序列設(shè)計(jì)引物,并對(duì)兩親本和部分F2個(gè)體的DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,產(chǎn)物電泳結(jié)果如圖2.由此初步推測(cè):大白菜紫心、非紫心基因與標(biāo)記A710位于同一對(duì)染色體上。圖2紫心F2單株中,最可能是雜合子的有
     
    (填數(shù)字編號(hào))。若上述推測(cè)成立,請(qǐng)解釋非紫心F2單株中10號(hào)和12號(hào)擴(kuò)增后的電泳結(jié)果
     
    。
    (4)研究人員發(fā)現(xiàn),位于標(biāo)記A710附近的Br基因內(nèi)部存在CTC重復(fù)序列,且該序列在兩親本中重復(fù)次數(shù)不同,如圖3所示。對(duì)全部F2個(gè)體中的Br基因片段進(jìn)行PCR擴(kuò)增,如果
     
    個(gè)體的擴(kuò)增結(jié)果中有長度為78個(gè)堿基對(duì)的片段,
     
    個(gè)體的擴(kuò)增結(jié)果中有長度為87個(gè)堿基對(duì)的片段,則可證明大白菜紫心和非紫心基因與Br基因位于同一對(duì)染色體上且完全連鎖,由此可知Br基因可對(duì)大白菜紫心基因進(jìn)行更有效的標(biāo)記和定位。
    (5)根據(jù)“微衛(wèi)星DNA”的特點(diǎn)判斷,應(yīng)用這種標(biāo)記可進(jìn)行的研究有
     
    (填字母)。
    A.人類親子鑒定              B.物種或品種間親緣關(guān)系鑒定
    C.誘導(dǎo)基因突變              D.物種和基因多樣性研究

    發(fā)布:2024/9/19 2:0:8組卷:48引用:2難度:0.3
  • 3.下列關(guān)于PCR的敘述,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/10/25 17:30:2組卷:18引用:2難度:0.7
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