腫瘤已成為嚴(yán)重危害人類健康的高發(fā)病,主要的治療手段有化療、放療和手術(shù)等,而腫瘤細(xì)胞對(duì)腫瘤藥物產(chǎn)生耐藥性是化療失敗的主要原因之一,研究表明腫瘤細(xì)胞耐藥性的產(chǎn)生與過(guò)量表達(dá)的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白BCRP有關(guān),研究人員嘗試建立穩(wěn)定表達(dá)BCRP的細(xì)胞系。回答下列問(wèn)題:
(1)研究人員從人的 癌細(xì)胞癌細(xì)胞(填“普通體細(xì)胞”或“癌細(xì)胞”)中提取出總RNA,逆轉(zhuǎn)錄后進(jìn)行PCR擴(kuò)增獲得大量BCRP基因。
(2)隨后構(gòu)建BCRP基因的真核表達(dá)載體,研究人員選擇了P質(zhì)粒作為載體,因?yàn)槠渚哂校孩倌鼙徽婧思?xì)胞識(shí)別的啟動(dòng)子,作用是 RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn);②抗新霉素的標(biāo)記基因;③多個(gè)限制酶切割位點(diǎn),作用是 便于插入多種外源基因便于插入多種外源基因。
(3)在不破壞表達(dá)載體各功能序列的基礎(chǔ)_上,對(duì)上述環(huán)狀載體進(jìn)行酶切得到線性化載體,隨后將其導(dǎo)入到受體細(xì)胞中,線性化載體可整合到染色體DNA上。聯(lián)系所學(xué)知識(shí)推測(cè)進(jìn)行酶切得到線性化載體的原因是 與環(huán)狀載體相比,線性化載體能更穩(wěn)定地存在并發(fā)揮功能與環(huán)狀載體相比,線性化載體能更穩(wěn)定地存在并發(fā)揮功能。
(4)通過(guò)篩選獲得抗新霉素的受體細(xì)胞,并對(duì)其進(jìn)行多層次檢測(cè),最終獲得能高效表達(dá)BCRP的細(xì)胞,在培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時(shí)間后分瓶進(jìn)行 傳代傳代(填“原代”或“傳代”)培養(yǎng),最終獲得穩(wěn)定細(xì)胞系,推測(cè)此細(xì)胞系在后續(xù)研究中的用途有 研究能阻止BCRP過(guò)量表達(dá)的藥物研究能阻止BCRP過(guò)量表達(dá)的藥物(寫出1點(diǎn))。
【考點(diǎn)】細(xì)胞的癌變的原因及特征.
【答案】癌細(xì)胞;RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn);便于插入多種外源基因;與環(huán)狀載體相比,線性化載體能更穩(wěn)定地存在并發(fā)揮功能;傳代;研究能阻止BCRP過(guò)量表達(dá)的藥物
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:25引用:1難度:0.6
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1.研究表明,癌細(xì)胞和正常分化的細(xì)胞在有氧條件下產(chǎn)生的ATP總量沒(méi)有明顯差異,但癌細(xì)胞從內(nèi)環(huán)境中攝取并用于細(xì)胞呼吸的葡萄糖是正常細(xì)胞的若干倍.如圖是癌細(xì)胞在有氧條件下葡萄糖的部分代謝過(guò)程,據(jù)圖分析回答問(wèn)題:
(1)圖中④過(guò)程發(fā)生的場(chǎng)所是
(2)在有氧條件下,癌細(xì)胞呼吸作用的方式為
(3)細(xì)胞在致癌因子的影響下,發(fā)布:2025/1/15 8:0:2組卷:6引用:1難度:0.3 -
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發(fā)布:2025/1/15 8:0:2組卷:1引用:1難度:0.7 -
3.研究表明,癌細(xì)胞和正常分化的細(xì)胞在有氧條件下產(chǎn)生的ATP總量沒(méi)有明顯差異,但癌細(xì)胞從細(xì)胞外液中攝取并用于細(xì)胞呼吸的葡萄糖是正常細(xì)胞的若干倍。如圖是癌細(xì)胞在有氧條件下葡萄糖的部分代謝過(guò)程。下列相關(guān)說(shuō)法,正確的是( ?。?br />
發(fā)布:2025/1/15 8:0:2組卷:9引用:1難度:0.7
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