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2022-2023學(xué)年江蘇省鹽城中學(xué)高三(上)開學(xué)生物試卷
>
試題詳情
角蛋白酶(KerA)能降解角蛋白,在飼料工業(yè)中具有廣闊的應(yīng)用前景。實驗小組將KerA基因?qū)氪竽c桿菌中,獲得了能高效表達KerA的工程菌,下圖1為含KerA基因的外源DNA、質(zhì)粒的有關(guān)信息,EcoRⅠ、BamHⅠ、SalⅠ、XhoⅠ均為限制酶,Kan
r
、Tc
r
分別為卡那霉素抗性基因、四環(huán)素抗性基因。請回答下列問題:
(1)為了獲取KerA基因,從天然菌株中提取相應(yīng)的DNA片段,再通過PCR技術(shù)大量擴增,PCR是
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)
的縮寫,若一個KerA基因在PCR儀中經(jīng)過4次循環(huán),需要消耗
30
30
個引物。
(2)為了形成合適的重組質(zhì)粒,應(yīng)該選用XhoⅠ和
BamHⅠ
BamHⅠ
限制酶切割外源DNA和質(zhì)粒DNA,其中不選用SalⅠ限制酶的原因是
SalⅠ會破壞目的基因
SalⅠ會破壞目的基因
。
(3)重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細胞的成功率很低,需經(jīng)篩選才能獲得導(dǎo)入成功的受體細胞。結(jié)合圖1獲得的重組質(zhì)粒,從對抗生素的敏感性角度分析,應(yīng)選擇
對四環(huán)素和卡那霉素都敏感
對四環(huán)素和卡那霉素都敏感
的細胞作為受體細胞,才有利于后續(xù)的篩選。
(4)將目的基因?qū)氪竽c桿菌時,常出現(xiàn)三種情況:未轉(zhuǎn)化的細菌、含空載體(普通質(zhì)粒)的細菌、含重組質(zhì)粒的細菌。下圖2是KerA基因重組質(zhì)粒的“工程菌”的篩選示意圖,已知培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分能滿足大腸桿菌的生存,且1號培養(yǎng)基中不含抗生素,那么在篩選重組質(zhì)粒時,2號培養(yǎng)基應(yīng)添加的抗生素是
四環(huán)素
四環(huán)素
,3號培養(yǎng)基添加的抗生素是
卡那霉素
卡那霉素
,2中的
B、D
B、D
(選用圖2中字母作答)菌落為含有目的基因的“工程菌”。
【考點】
基因工程的操作過程綜合
.
【答案】
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng);30;BamHⅠ;SalⅠ會破壞目的基因;對四環(huán)素和卡那霉素都敏感;四環(huán)素;卡那霉素;B、D
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/7/31 8:0:9
組卷:24
引用:3
難度:0.6
相似題
1.
新冠病毒(+RNA)的刺突蛋白S通過與人體黏膜細胞表面的ACE2受體結(jié)合而進入細胞,是宿主抗體的重要作用位點。如圖1是科研人員利用新冠病毒的+RNA提取S蛋白基因和S蛋白受體結(jié)合域RBD基因作為抗原基因序列,研制新冠病毒雙抗原疫苗的技術(shù)路線。已知PCR1與PCR2要分別進行,然后將產(chǎn)物混合,使用引物1和引物4進行PCR3,最終獲得大量S-RBD融合基因(1500bp)。
(1)PCR3過程中,片段1與片段2連接形成S-RBD融合基因,需要使用
酶。為使S-RBD融合基因能與pX質(zhì)粒相連接,并在工程菌中表達時先合成S蛋白,則PCR1過程中,應(yīng)在引物1的5′端添加的限制酶序列是
。
(2)為初步檢測過程B構(gòu)建是否成功,用EcoRⅠ、NdeⅠ、HindⅢ對重組pX系列質(zhì)粒進行完全酶切,然后對重組pX系列質(zhì)粒及其酶切產(chǎn)物進行凝膠電泳檢測,結(jié)果如圖2。據(jù)圖可知,重組質(zhì)粒pX2和pX5構(gòu)建成功的依據(jù)是
。
(3)在工程菌的篩選時,可先后用兩種抗生素進行影印培養(yǎng)實驗(即使用無菌的絨氈布壓在培養(yǎng)基A的菌落上,帶出少許菌種,平移并壓在培養(yǎng)基B上),在培養(yǎng)基B中存活的菌落是否含有目的基因
(填“是”或“否”)。鑒定重組pX質(zhì)粒是否導(dǎo)入工程菌還可以采用的方法是
。
(4)試從免疫學(xué)角度分析此種雙抗原疫苗比常規(guī)S蛋白疫苗更具優(yōu)勢的原因
。
發(fā)布:2024/10/26 12:30:1
組卷:14
引用:3
難度:0.6
解析
2.
某研究小組利用水稻細胞培育能產(chǎn)生HPV(人乳頭瘤病毒)-L1蛋白的水稻胚乳細胞生物反應(yīng)器,為獲得HPV-L1蛋白提供一種新的高效、低廉的途徑,用于制備HPV疫苗。其基本流程包括表達載體的構(gòu)建、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化、水稻細胞轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)基因植株的篩選等步驟,最終獲得能產(chǎn)生含HPV-L1蛋白胚乳細胞的轉(zhuǎn)基因水稻?;卮鹣铝袉栴}:
(1)PCR是獲取HPV-L1基因的一種方法,PCR反應(yīng)體系設(shè)計的兩種引物,在引物間和引物內(nèi)的堿基都不能互補,其原因是
。
(2)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化:科研人員構(gòu)建了如圖所示的表達載體,將其與經(jīng)過Ca
2+
處理后的農(nóng)桿菌細胞混合,隨后將菌液涂布在含
的培養(yǎng)基上培養(yǎng),挑取菌落進行PCR鑒定后再擴大培養(yǎng)待用。
(3)水稻細胞轉(zhuǎn)化:取水稻離體組織置于誘導(dǎo)培養(yǎng)基啟動子潮霉素啟動子抗性基因中發(fā)生
過程形成愈傷組織。挑取生長良好的愈傷組織加入到(2)中得到的菌液中共培養(yǎng),完成轉(zhuǎn)化過程。
(4)轉(zhuǎn)基因水稻的篩選:將轉(zhuǎn)化處理后的水稻愈傷組織放在含
(抗生素)的培養(yǎng)基中選擇培養(yǎng),并誘導(dǎo)出轉(zhuǎn)基因水稻。
(5)水稻胚乳生物反應(yīng)器具有提取和處理產(chǎn)物簡易、生產(chǎn)成本低和生物安全性高等特點,從而被廣泛應(yīng)用。請在分子水平上提出兩個提高水稻胚乳生物反應(yīng)器產(chǎn)物產(chǎn)量的思路:
。
發(fā)布:2024/10/25 0:0:1
組卷:5
引用:1
難度:0.5
解析
3.
α-淀粉酶被廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)過程中。為獲得催化活性高的α-淀粉酶,科研人員利用細菌進行改造。
(1)α-淀粉酶能將
水解為低聚糖和單糖,其催化活性高低往往取決于該酶活性中心的
結(jié)構(gòu)。
(2)科研人員提取枯草芽孢桿菌的表達載體,插入大腸桿菌復(fù)制原點以及氨芐青霉素抗性基因,構(gòu)建如圖所示重組穿梭載體。
①根據(jù)α-淀粉酶活性中心的氨基酸序列,通過
工程得到α-淀粉酶突變基因。
②構(gòu)建圖中所示重組穿梭載體需要的酶是
。插入大腸桿菌復(fù)制原點的目的是
。
③將含有α-淀粉酶突變基因的重組穿梭載體導(dǎo)入
的大腸桿菌細胞中。將大腸桿菌菌液涂布于含
的選擇培養(yǎng)基上,待長出菌落后,用PCR方法檢驗成功轉(zhuǎn)化的細胞。
(3)培養(yǎng)轉(zhuǎn)化成功的大腸桿菌并從中提取重組穿梭載體,導(dǎo)入枯草芽孢桿菌。將培養(yǎng)得到的枯草桿菌菌液涂布于含淀粉的培養(yǎng)基上,一段時間后選擇
的菌落,從中可篩選得到催化活性較高的α-淀粉酶。
(4)請舉一例說明本實驗獲得的催化活性高的α-淀粉酶在生產(chǎn)中的應(yīng)用價值:
。
發(fā)布:2024/10/25 17:0:1
組卷:13
引用:1
難度:0.6
解析
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