2019年底爆發(fā)的新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)是由SARS-CoV-2病毒引起的,能否快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)出病原體,成為疾病防控的關(guān)鍵。請(qǐng)回答:
(1)如圖表示SARS-CoV-2病毒檢測(cè)的部分流程??茖W(xué)家以病毒的RNA為模板,通過(guò)①逆轉(zhuǎn)錄(或:反轉(zhuǎn)錄)逆轉(zhuǎn)錄(或:反轉(zhuǎn)錄)過(guò)程合成cDNA,再對(duì)cDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,這項(xiàng)技術(shù)稱(chēng)為RT-PCR。
(2)進(jìn)行RT-PCR需要加入的酶是:逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq酶Taq酶。要從cDNA中擴(kuò)增出新冠病毒特有的基因序列ORFlab和核殼蛋白基因N,關(guān)鍵在于要加入(ORF1ab和核殼蛋白基因N)的特異性引物(ORF1ab和核殼蛋白基因N)的特異性引物、dNTP及所需的酶一起構(gòu)成反應(yīng)體系。
(3)RT-PCR加入Taqman熒光探針可以通過(guò)測(cè)定熒光強(qiáng)度來(lái)檢測(cè)產(chǎn)物濃度,原理如下:
Taqman熒光探針為一段與目的基因目的基因互補(bǔ)的核苷酸單鏈,兩端分別連接一個(gè)熒光基團(tuán)R和一個(gè)淬滅基團(tuán)Q.探針結(jié)構(gòu)完整時(shí),R發(fā)射的熒光被Q吸收;而PCR擴(kuò)增時(shí)結(jié)合在模板鏈上的探針被切斷,使R和Q分離,R基團(tuán)發(fā)射的熒光不被淬滅,這樣通過(guò)對(duì)熒光信號(hào)強(qiáng)弱的監(jiān)測(cè)就可實(shí)現(xiàn)對(duì)產(chǎn)物的檢測(cè)。熒光信號(hào)達(dá)到設(shè)定的閾值時(shí),經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)越少,說(shuō)明含有病毒的概率越大大。
(4)一次核酸檢測(cè)歷時(shí)需16小時(shí),為快速檢測(cè)可采用抗原一抗體雜交技術(shù),這一技術(shù)的關(guān)鍵是要生產(chǎn)出能與新冠病毒結(jié)合的特異性抗體,請(qǐng)寫(xiě)出生產(chǎn)這種抗體的思路:①向小鼠體內(nèi)注射新冠病毒的抗原蛋白(或滅活的新冠病毒):
②提取免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,經(jīng)多次篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞;
③將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)、或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖,從培養(yǎng)液或小鼠腹水中就提取大量的單克隆抗體①向小鼠體內(nèi)注射新冠病毒的抗原蛋白(或滅活的新冠病毒):
②提取免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,經(jīng)多次篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞;
③將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)、或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖,從培養(yǎng)液或小鼠腹水中就提取大量的單克隆抗體。
②提取免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,經(jīng)多次篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞;
③將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)、或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖,從培養(yǎng)液或小鼠腹水中就提取大量的單克隆抗體
②提取免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,經(jīng)多次篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞;
③將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)、或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖,從培養(yǎng)液或小鼠腹水中就提取大量的單克隆抗體
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定;目的基因的篩選與獲取.
【答案】逆轉(zhuǎn)錄(或:反轉(zhuǎn)錄);逆轉(zhuǎn)錄酶;Taq酶;(ORF1ab和核殼蛋白基因N)的特異性引物;目的基因;大;①向小鼠體內(nèi)注射新冠病毒的抗原蛋白(或滅活的新冠病毒):
②提取免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,經(jīng)多次篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞;
③將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)、或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖,從培養(yǎng)液或小鼠腹水中就提取大量的單克隆抗體
②提取免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,經(jīng)多次篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞;
③將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)、或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖,從培養(yǎng)液或小鼠腹水中就提取大量的單克隆抗體
【解答】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:27引用:1難度:0.6
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發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:6引用:2難度:0.6 -
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