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水稻基因組中的B基因僅在體細胞(2n)和精子中正常表達,在卵細胞中則不能正常轉錄。為研究B基因表達對卵細胞的影響,設計了如下實驗。
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據圖回答下列問題:
(1)B基因在水稻卵細胞中不轉錄,推測其可能的原因是卵細胞中
D
D
。
A.B基因發(fā)生基因突變
B.DNA聚合酶失活
C.含B基因的染色體缺失
D.B基因的啟動子無法啟動轉錄
(2)從水稻體細胞或
精子
精子
中提取總RNA,然后通過
逆轉錄
逆轉錄
獲得DNA,進而獲得B基因編碼蛋白的序列。將該序列與Luc基因連接成融合基因(表達的蛋白質能保留兩種蛋白質各自的功能),然后構建重組表達載體。
(3)在過程①、②轉化篩選時,過程
中T-DNA整合到受體細胞染色體DNA上,過程
在培養(yǎng)基中應加入卡那霉素。
(4)某研究小組欲利用PCR技術對水稻細胞中的B基因進行擴增,以下相關敘述正確的是
ABC
ABC

A.PCR反應需要在一定的緩沖溶液中才能進行,緩沖溶液中一般要添加Mg2+
B.PCR的產物一般通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定,凝膠中的DNA分子需要染色
C.利用PCR技術擴增B基因時,子鏈延伸方向與體內轉錄時子鏈延伸方向相同
D.在PCR反應體系中需要添加多種酶,其中包括解旋酶及耐高溫的DNA聚合酶
(5)從轉基因植株未成熟種子中分離出胚,觀察到細胞內僅含一個染色體組,判定該胚是由未受精的卵細胞發(fā)育形成的,而一般情況下水稻卵細胞在未受精時不進行發(fā)育,由此表明
B基因表達能使卵細胞不經受精直接發(fā)育成胚
B基因表達能使卵細胞不經受精直接發(fā)育成胚
。

【答案】D;精子;逆轉錄;②;①;ABC;B基因表達能使卵細胞不經受精直接發(fā)育成胚
【解答】
【點評】
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