乳鏈菌肽是由乳酸乳球菌分泌的一種由34個(gè)氨基酸組成的小肽，對許多革蘭氏陽性菌，尤其是對引起食品腐敗的細(xì)菌具有強(qiáng)烈的抑制作用，是一種高效無毒的天然食品防腐劑。研究人員從新鮮牛奶中獲得多株產(chǎn)乳鏈菌肽的菌株，進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)：
（1）篩選菌株：
將含有殺菌物質(zhì)的濾紙片放到滴有細(xì)菌培養(yǎng)液的固體培養(yǎng)基上，經(jīng)過培養(yǎng)，殺菌物質(zhì)殺死細(xì)菌后會(huì)在濾紙片周圍形成抑菌圈。將革蘭氏陽性菌涂布于平板上，將已經(jīng)滅菌的大小相同的濾紙片均勻地?cái)[放在培養(yǎng)基表面，在其上分別滴加等量備選菌株培養(yǎng)液的上清液，對比觀察

抑菌圈的大小

抑菌圈的大小

，選取抑制作用最強(qiáng)的菌株。
（2）純化菌株：（圖1）
A過程配制時(shí)除了加入特定的營養(yǎng)物質(zhì)以外，還要加入一定量的氯化鈉，以維持滲透壓。
B過程常用的方法是

高壓蒸汽滅菌法

高壓蒸汽滅菌法

。
D過程與C過程相比，培養(yǎng)基中增加的物質(zhì)是

瓊脂

瓊脂

。
E過程需將純化的菌株接種于

固體斜面

固體斜面

培養(yǎng)基中4℃保存。
（3）為了解乳鏈菌肽對革蘭氏陽性菌的作用方式是抑制細(xì)菌生長、溶菌性殺死細(xì)菌（細(xì)胞破裂）還是非溶菌性殺死細(xì)菌，科研人員將乳鏈菌肽加入革蘭氏陽性菌菌液中，隨著發(fā)酵時(shí)間的延長，檢測革蘭氏陽性菌的活菌數(shù)、除去菌體的上清液中核酸含量，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2所示。
對革蘭氏陽性菌活菌的計(jì)數(shù)方法為

稀釋涂布平板法

稀釋涂布平板法

。以上實(shí)驗(yàn)表明乳鏈菌肽對革蘭氏陽性菌的作用方式為

非溶菌性殺死細(xì)菌

非溶菌性殺死細(xì)菌

，理由是

曲線3活菌數(shù)降為零，說明是殺死細(xì)菌

曲線3活菌數(shù)降為零，說明是殺死細(xì)菌

；

除去菌體的上清液中核酸含量沒有明顯變化，說明不是溶菌

除去菌體的上清液中核酸含量沒有明顯變化，說明不是溶菌

。
（4）研究表明乳酸乳球菌不僅有合成乳鏈菌肽的編碼基因，還有相關(guān)的免疫基因以確保分泌的乳鏈菌肽對自身細(xì)胞并不會(huì)產(chǎn)生傷害，其中可以用作基因工程中的標(biāo)記基因的是

免疫基因

免疫基因

。
（5）乳鏈菌肽作為天然防腐劑，但不會(huì)改變?nèi)梭w腸道中的正常菌群，也不會(huì)進(jìn)入內(nèi)環(huán)境，推測可能的原因是

可能被消化道中蛋白酶所降解

可能被消化道中蛋白酶所降解

。