科學(xué)家嘗試使用Cre/loxP位點(diǎn)特異性重組系統(tǒng),在檢測目的基因?qū)氤晒?,刪除轉(zhuǎn)基因煙草細(xì)胞內(nèi)的抗除草劑基因.其技術(shù)過程如下(圖中的■代表基因前的啟動(dòng)子,啟動(dòng)子是基因(gene)的一個(gè)組成部分,控制基因表達(dá)(轉(zhuǎn)錄)的起始時(shí)間和表達(dá)的程度.啟動(dòng)子就像“開關(guān)”,決定基因的活動(dòng).),據(jù)圖1回答:
(1)loxP是一種只有34個(gè)堿基對構(gòu)成的小型DNA片段,是有兩個(gè)13個(gè)堿基對反向重復(fù)序列和中間間隔的8個(gè)堿基對序列共同組成,自身不會表達(dá),插入質(zhì)粒后也不影響原有基因的表達(dá),其堿基序列如下:
Cre酶能特異性地識別此序列并在箭頭處切開loxP,其功能類似于基因工程中的限制酶限制酶酶.從遺傳學(xué)角度分析,Cre酶改變質(zhì)粒產(chǎn)生的結(jié)果相當(dāng)于可遺傳變異中的基因重組基因重組.
(2)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入到植物細(xì)胞后,通過脫分化脫分化和再分化再分化兩個(gè)過程可以形成完整的植株.作為標(biāo)記基因,抗除草劑基因用于檢測目的基因是否導(dǎo)入成功的原理是抗除草劑基因和目的基因在同一個(gè)質(zhì)粒上抗除草劑基因和目的基因在同一個(gè)質(zhì)粒上.
(3)經(jīng)檢測成功后,抗除草劑基因已沒有用途,繼續(xù)留在植物體內(nèi)可能會造成的安全問題是抗除草劑基因可能轉(zhuǎn)移到雜草中抗除草劑基因可能轉(zhuǎn)移到雜草中.經(jīng)Cre酶處理后,質(zhì)粒中的兩個(gè)loxP序列分別被切開后,可得到如上圖右側(cè)的這兩個(gè)DNA分子.由于抗除草劑基因前沒有了啟動(dòng)子抗除草劑基因前沒有了啟動(dòng)子_的原因,抗除草劑基因不再表達(dá),之后會在培養(yǎng)過程中消失.
(4)loxP序列是有方向性的.如果經(jīng)Cre酶處理后,發(fā)現(xiàn)抗除草劑基因反向連接在質(zhì)粒一上,則原來質(zhì)粒一中這兩個(gè)loxP序列的方向是CC.
A.兩個(gè)都是正向 B.兩個(gè)都是反向 C.一個(gè)正向一個(gè)反向 D.與方向無關(guān).
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】限制酶;基因重組;脫分化;再分化;抗除草劑基因和目的基因在同一個(gè)質(zhì)粒上;抗除草劑基因可能轉(zhuǎn)移到雜草中;抗除草劑基因前沒有了啟動(dòng)子;C
【解答】
【點(diǎn)評】
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