2020年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授予開(kāi)發(fā)CRISPR基因組定向編輯技術(shù)的兩位科學(xué)家。CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)由gRNA和Cas9蛋白（能夠切割DNA的酶）組成。CRISPR/Cas9系統(tǒng)作用原理如圖所示，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）將gRNA基因和Cas9編碼基因重組到質(zhì)粒并利用顯微注射顯微注射技術(shù)導(dǎo)入受精卵，在受精卵內(nèi)gRNA基因通過(guò)轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生gRNA，Cas9編碼基因通過(guò)轉(zhuǎn)錄和翻譯（表達(dá)）轉(zhuǎn)錄和翻譯（表達(dá)）產(chǎn)生Cas9蛋白。gRNA和Cas9蛋白共同構(gòu)成基因編輯系統(tǒng)，對(duì)靶向基因?qū)崿F(xiàn)定點(diǎn)編輯?？赏ㄟ^(guò)PCRPCR技術(shù)在體外獲得大量的Cas9編碼基因，該技術(shù)的原理是DNA（雙鏈）復(fù)制DNA（雙鏈）復(fù)制。
（2）據(jù)圖可知gRNA是一段能和靶向基因上特定序列互補(bǔ)能和靶向基因上特定序列互補(bǔ)的單鏈RNA，從而定向引導(dǎo)Cas9蛋白與靶向基因結(jié)合，并在特定位點(diǎn)切割DNA，該過(guò)程斷裂的是磷酸二酯磷酸二酯鍵。
（3）靶向基因中的PAM序列是gRNA的重點(diǎn)識(shí)別區(qū)域，以幫助Cas9蛋白實(shí)現(xiàn)對(duì)靶基因的切割和后續(xù)編輯。由于大多數(shù)基因中都含PAM序列大多數(shù)基因中都含PAM序列，因此CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)能夠?qū)Υ蠖鄶?shù)基因進(jìn)行定點(diǎn)編輯。
（4）某科研團(tuán)隊(duì)從轉(zhuǎn)移性非小細(xì)胞肺癌患者中分離出T細(xì)胞，使用CRISPR/Cas9技術(shù)敲除細(xì)胞中的PD-1基因，在體外擴(kuò)增到一定量后再重新輸回患者體內(nèi)，達(dá)到殺死腫瘤細(xì)胞的目的，這屬于體外體外基因治療。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】顯微注射；轉(zhuǎn)錄；轉(zhuǎn)錄和翻譯（表達(dá)）；PCR；DNA（雙鏈）復(fù)制；能和靶向基因上特定序列互補(bǔ)；磷酸二酯；大多數(shù)基因中都含PAM序列；體外
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：23引用：2難度：0.7
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1．紅細(xì)胞生成素（EPO）是人體內(nèi)促進(jìn)紅細(xì)胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然 EPO來(lái)源極為有限，某科研團(tuán)隊(duì)采用基因工程培育轉(zhuǎn)基因羊作為乳腺生物反應(yīng)器，使其能合成EPO。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ）
發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
2．煙草是我國(guó)一些地區(qū)的經(jīng)濟(jì)作物之一，提高煙草質(zhì)量有利于提高經(jīng)濟(jì)收入。我國(guó)科研團(tuán)隊(duì)研究了一種轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種，抗鹽基因的結(jié)構(gòu)和獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過(guò)程（①～⑤）如圖所示。回答下列問(wèn)題：
（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過(guò)程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項(xiàng)）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對(duì)目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過(guò)程（填序號(hào)）。過(guò)程②③采用的方法是。
（4）⑤過(guò)程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過(guò)程中，這兩種植物激素的比例會(huì)發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
3．如表為5種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)，如圖為某種質(zhì)粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點(diǎn)?，F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中，以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說(shuō)法正確的是（ ?。?
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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