PCR技術是20世紀80年代發(fā)展起來的新技術,廣泛應用于分子生物學、基因工程及其他與DNA鑒定相關的領域,如疾病檢測、商品檢疫、法醫(yī)鑒定等?;卮鹣铝袉栴};
(1)引物是PCR技術中的關鍵物質(zhì)。利用PCR技術擴增某個致病基因時,所設計的一對引的特點。引物必須具備兩種引物分別與致病基因的兩條單鏈配對兩種引物分別與致病基因的兩條單鏈配對和兩種引物間不能互補配對兩種引物間不能互補配對的特點。
(2)將PCR所需的物質(zhì)準備完畢后,在PCR儀上用94~96℃的溫度預熱5min,其目的是利用高溫使DNA變性形成單鏈片段利用高溫使DNA變性形成單鏈片段。溫度降低到50~60℃后,發(fā)生引物與模板鏈的結合引物與模板鏈的結合,將溫度回升至72℃,反應體系中的熱穩(wěn)定DNA聚合熱穩(wěn)定DNA聚合酶催化dNTPdNTP合成雙鏈DNA。
(3)多重PCR技術在一個反應體系中使用兩對以上的引物,可應用于檢測食品中的多種致病菌,原因是待測樣品存在多種致病菌,每對引物用于擴增某種致病菌的特異性基因,多對引物可同時擴增出多種目的基因待測樣品存在多種致病菌,每對引物用于擴增某種致病菌的特異性基因,多對引物可同時擴增出多種目的基因。
【考點】目的基因的篩選與獲取.
【答案】兩種引物分別與致病基因的兩條單鏈配對;兩種引物間不能互補配對;利用高溫使DNA變性形成單鏈片段;引物與模板鏈的結合;熱穩(wěn)定DNA聚合;dNTP;待測樣品存在多種致病菌,每對引物用于擴增某種致病菌的特異性基因,多對引物可同時擴增出多種目的基因
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:35引用:2難度:0.7
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1.雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP)與脫氧核苷三磷酸(dNTP)的結構如圖所示。已知ddNTP按堿基互補配對的方式加到正在復制的DNA子鏈中后,子鏈的延伸立即終止。現(xiàn)通過PCR技術獲得被標記且以堿基“T”為末端的、不同長度的DNA子鏈片段。在反應管中已經(jīng)有單鏈模板、引物、相關的酶和相應的緩沖液等,還需加入的原料是( ?。?br />
①dCTP,dGTP,dATP
②dGTP,dATP,dTTP,dCTP
③α位被32P標記的ddTTP
④γ位被32P標記的ddTTP發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:27引用:1難度:0.6 -
2.通過設計引物,運用PCR技術可以實現(xiàn)目的基因的定點誘變。如圖為基因工程中獲取突變基因的過程,其中引物1序列中含有一個堿基T不能與目的基因片段配對,但不影響引物與模板鏈的整體配對,反應體系中引物1和引物2的5′端分別設計增加限制酶a和限制酶b的識別位點。有關敘述正確的是( ?。?/h2>
發(fā)布:2024/11/19 10:30:1組卷:116引用:5難度:0.7 -
3.目前研究混雜DNA群體中的特異DNA序列,一般基于兩種不同的方法,即DNA克隆和DNA分子雜交,如圖所示。下列有關敘述正確的是( ?。?/h2>
發(fā)布:2024/11/22 4:0:1組卷:22引用:2難度:0.6