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菁優(yōu)網(wǎng)基因遞送是植物遺傳改良的重要技術(shù)之一,我國多個實驗室合作開發(fā)了一種新型基因遞送系統(tǒng)(切一浸一生芽即Cut-Dip-Budding,簡稱CDB法)。圖1與圖2是分別利用常規(guī)轉(zhuǎn)化法和CDB法在某植物中遞送基因的示意圖?;卮鹣铝袉栴}。
(1)圖1中,從外植體形成愈傷組織的過程稱為
脫分化
脫分化
;從愈傷組織到幼苗的培養(yǎng)過程需要的激素有生長素和
細胞分裂素
細胞分裂素

(2)圖1與圖2中,農(nóng)桿菌侵染植物細胞時,可將外源基因遞送到植物細胞中的原因是
Ti質(zhì)粒中的T-DNA能將外源基因遞送到植物細胞中,并與植物細胞的染色體DNA整合到一起
Ti質(zhì)粒中的T-DNA能將外源基因遞送到植物細胞中,并與植物細胞的染色體DNA整合到一起
。
(3)已知某酶(PDS)缺失會導致植株白化。某團隊構(gòu)建了用于敲除PDS基因的CRISPR/Cas9基因編輯載體(含有綠色熒光蛋白標記基因),利用圖2中的CDB法將該重組載體導入植株B,長出毛狀根,成功獲得轉(zhuǎn)化植株B.據(jù)此分析,從毛狀根中獲得陽性毛狀根段的方法是
熒光檢測選擇帶有綠色熒光標記的毛狀根
熒光檢測選擇帶有綠色熒光標記的毛狀根
,圖2中,鑒定導入幼苗中的基因編輯載體是否成功發(fā)揮作用的方法是
觀察幼苗是否表現(xiàn)出白化特征
觀察幼苗是否表現(xiàn)出白化特征
。
(4)與常規(guī)轉(zhuǎn)化法相比,采用CDB法進行基因遞送的優(yōu)點是
操作方法簡單,不需要借助植物組織培養(yǎng)技術(shù)進行操作,且培養(yǎng)周期短
操作方法簡單,不需要借助植物組織培養(yǎng)技術(shù)進行操作,且培養(yǎng)周期短
(答2點)。
【答案】脫分化;細胞分裂素;Ti質(zhì)粒中的T-DNA能將外源基因遞送到植物細胞中,并與植物細胞的染色體DNA整合到一起;熒光檢測選擇帶有綠色熒光標記的毛狀根;觀察幼苗是否表現(xiàn)出白化特征;操作方法簡單,不需要借助植物組織培養(yǎng)技術(shù)進行操作,且培養(yǎng)周期短
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復制發(fā)布。
發(fā)布:2024/8/21 9:0:4組卷:7引用:2難度:0.6
相似題
  • 1.1965年中國科學家人工合成了具有生物活性的結(jié)晶牛胰島素,摘取了人工合成蛋白質(zhì)的桂冠,如圖是利用基因工程生產(chǎn)人胰島素過程中使用的質(zhì)粒及目的基因的部分結(jié)構(gòu)。請回答下列問題。
    ?菁優(yōu)網(wǎng)
    (1)質(zhì)粒上ori序列的堿基特點是
     
    比值較高,圖示胰島素基因的轉(zhuǎn)錄以
     
    鏈作為模板。
    (2)在設(shè)計PCR引物時最好在引物的
     
    端添加限制酶
     
    的識別序列,PCR反應(yīng)體系中引物的延伸需要TaqDNA聚合酶,此酶需要
     
    (離子)的激活。
    (3)生產(chǎn)過程中目的基因是利用胰島B細胞中的mRNA反轉(zhuǎn)錄得到的胰島素基因,不直接使用細胞中酶切獲得的的胰島素基因原因是
     
    。
    (4)科學家運用大引物PCR定點突變技術(shù)對胰島素第28位氨基酸實現(xiàn)了替換,獲得了速效胰島素類似物產(chǎn)品。相關(guān)原理如圖所示。
    菁優(yōu)網(wǎng)
    ①第一次PCR至少需要
     
    個循環(huán)才能獲得相應(yīng)的大引物模板,第二次PCR應(yīng)選用大引物兩條鏈中的
     
    (填“A”或“B”),若第二次PCR計劃循環(huán)n次,至少需要大引物
     
    個。
    ②β-半乳糖苷酶可以分解無色的X-gal產(chǎn)生藍色物質(zhì)使菌落呈現(xiàn)藍色,否則菌落為白色。將轉(zhuǎn)化后的大腸桿菌接種到添加了
     
    的培養(yǎng)基上,若觀察到菌落呈現(xiàn)白色,則表明
     
    。
    發(fā)布:2024/10/12 15:0:1組卷:21引用:1難度:0.6
  • 2.種子大小是作物重要的產(chǎn)量性狀。研究者對野生型擬南芥(2n=10)進行誘變篩選到一株種子增大的突變體。通過遺傳分析和測序,發(fā)現(xiàn)野生型DAI基因發(fā)生一個堿基G到A的替換,突變后的基因為隱性基因,據(jù)此推測突變體的表型與其有關(guān),開展相關(guān)實驗?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)擬采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將野生型DAI基因轉(zhuǎn)入突變體植株,用PCR反應(yīng)擴增DAI基因,用限制性內(nèi)切核酸酶對PCR產(chǎn)物和
     
    進行切割,用DNA連接酶將兩者連接。為確保插入的DAI基因可以正常表達,其上下游序列需具備
     
    。
    (2)轉(zhuǎn)化后,T-DNA(其內(nèi)部基因在減數(shù)分裂時不發(fā)生交換)可在基因組單一位點插入也可以同時插入多個位點。在插入片段均遵循基因分離及自由組合定律的前提下,選出單端一位點插入的植株,并進一步獲得目的基因穩(wěn)定遺傳的植株(如圖),用于后續(xù)驗證突變基因與表型的關(guān)系。
    菁優(yōu)網(wǎng)
    ①農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化T0代植株并自交,將T1代種子播種在選擇培養(yǎng)基上,能夠萌發(fā)并生長的陽性個體即表示其基因組中插入了
     
    。
    ②T1代陽性植株自交所得的T2代種子按單株收種并播種于選擇培養(yǎng)基,選擇陽性率約
     
    %的培養(yǎng)基中幼苗繼續(xù)培養(yǎng)。
    ③將②中選出的T2代陽性植株
     
    (填“自交”、“與野生型雜交”或“與突變體雜交”)所得的T3代種子按單株收種并播種于選擇培養(yǎng)基,陽性率達到
     
    %的培養(yǎng)基中的幼苗即為目標轉(zhuǎn)基因植株。
    發(fā)布:2024/10/15 0:0:1組卷:9引用:1難度:0.4
  • 3.RNA沉默是雙鏈RNA被特異性的核酸酶降解,產(chǎn)生小干擾RNA(siRNA),這些siRNA與同源的靶RNA互補結(jié)合,特異降解靶RNA,從而抑制基因表達。棉蚜是棉花的主要害蟲,嚴重危害棉花的生產(chǎn)。E基因是棉蚜生長發(fā)育的重要基因,為了控制棉蚜對棉花的危害,科研人員通過轉(zhuǎn)基因技術(shù),在棉花中表達棉蚜E基因的雙鏈RNA(dsRNA),特異性抑制棉蚜內(nèi)源E基因的表達。如圖是主要流程,請回答:

    限制酶 識別序列和切點
    EcoRⅠ G↓AATTC
    KpnⅠ G↓GTACC
    BamHⅠ G↓GATCC
    XbaⅠ T↓CTAGA
    菁優(yōu)網(wǎng)
    (1)根據(jù)PCR1反應(yīng)體系中加入的引物1和2推測PCR2中加入的引物為
     

    A.5'-AAATCTAGAAGCGACTCAAGATCATGGAGTAT-3'
    B.5'-AAATCTAGACTGCCACTTCTTCAACTAATTCT-3'
    C.5'-AAAGGATCCAGCGACTCAAGATCATGGAGTAT-3'
    D.5'-AAAGGATCCCTGCCACTTCTTCAACTAATTCT-3'
    (2)從理論上推測,PCR1第五輪循環(huán)產(chǎn)物中含有引物1的DNA片段所占的比例為
     
    。圖中正義序列和反義序列中堿基排列順序
     
    (填“大多數(shù)相同”或“大多數(shù)不同”或“相同”或“不同”)。過程①需要的工具酶除限制酶外還需要
     
    。
    (3)過程②將表達載體轉(zhuǎn)化到經(jīng)
     
    處理的農(nóng)桿菌菌株后,為了確定重組質(zhì)粒已經(jīng)成功轉(zhuǎn)化可以通過
     
    驗證。
    (4)過程④愈傷組織形成棉花植株的過程稱為
     
    。轉(zhuǎn)基因棉花再生植株移栽到溫室后,葉片涂抹
     
    檢測抗性,并提取DNA進行PCR分析。
    (5)科研人員采用特定的方法大量提取成功轉(zhuǎn)化的4株棉花植株葉片的基因組DNA,用HindⅢ完全消化,消化產(chǎn)物經(jīng)電泳、轉(zhuǎn)膜后與目的基因的探針雜交,其雜交帶結(jié)果如圖2所示(圖中數(shù)字2~5代表轉(zhuǎn)化成功的植株,數(shù)字1代表對照組)。下列有關(guān)分析正確的有
     
    。
    ①對照組可以用非轉(zhuǎn)基因棉花的基因組DNA進行實驗
    ②數(shù)字3所代表的植株中目的基因插入染色中的兩個不同位置
    ③選擇HindⅢ進行消化的原因是基因組DNA中一般只有1~2切點
    ④相同位置上雜交帶對應(yīng)DNA片段的脫氧核苷酸序列相同
    (6)科研人員進一步鑒定上述4號泳道對應(yīng)的植株,確定獲得一株轉(zhuǎn)基因抗性植株CZ4,CZ4連續(xù)自交兩代,則F2中抗性植株占比為
     
    。
    發(fā)布:2024/10/17 17:0:4組卷:11引用:1難度:0.4
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