玉米是世界上的第三大糧食作物，廣泛種植于世界各地。研究表明，轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)玉米中的抗蟲(chóng)基因是從細(xì)菌中分離出的BT毒蛋白基因，這種基因編碼的蛋白質(zhì)會(huì)進(jìn)入害蟲(chóng)的腸道，能有效殺死玉米螟（一種農(nóng)業(yè)害蟲(chóng)）。結(jié)合上述資料請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）BT毒蛋白基因在基因工程中稱(chēng)為

目的基因

目的基因

，其除了這種編碼蛋白質(zhì)的基因外，還可以是

具有調(diào)控作用的因子

具有調(diào)控作用的因子

。在構(gòu)建基因表達(dá)載體的過(guò)程中，除了要有BT毒蛋白基因外，還必須有啟動(dòng)子、終止子和

標(biāo)記基因

標(biāo)記基因

。
（2）在利用PCR技術(shù)擴(kuò)增BT毒蛋白基因時(shí)，需要提供模板、原料、引物、

熱穩(wěn)定DNA聚合酶/Taq酶

熱穩(wěn)定DNA聚合酶/Taq酶

等條件，將模板DNA加熱至90～95℃的目的是

使BT毒蛋白基因（受熱后）解開(kāi)為單鏈

使BT毒蛋白基因（受熱后）解開(kāi)為單鏈

。
（3）BT毒蛋白基因與載體結(jié)合過(guò)程中需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶。若某限制酶的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)是，請(qǐng)畫(huà)出BT毒蛋白基因被限制酶切割后所形成的黏性末端

。DNA連接酶對(duì)所連接的兩端堿基序列

沒(méi)有

沒(méi)有

（填“有”或“沒(méi)有”）專(zhuān)一性要求。
（4）為了防止抗蟲(chóng)玉米通過(guò)花粉傳播帶來(lái)的生態(tài)學(xué)問(wèn)題，科研小組考慮將抗蟲(chóng)基因?qū)氲接衩赘饧?xì)胞的

線粒體

線粒體

中以防止基因污染，同時(shí)在大規(guī)模種植的抗蟲(chóng)玉米田中設(shè)置一個(gè)或多個(gè)避難所來(lái)種植普通玉米，目的是

延緩抗毒蛋白的玉米螟出現(xiàn)（或減緩害蟲(chóng)抗性基因頻率增加的速度）

延緩抗毒蛋白的玉米螟出現(xiàn)（或減緩害蟲(chóng)抗性基因頻率增加的速度）

。