2020年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予了在發(fā)現(xiàn)丙型肝炎病毒(HCV)方面做出卓越貢獻(xiàn)的三位科學(xué)家。研究表明,HCV的遺傳物質(zhì)為一條單鏈RNA.某研發(fā)團(tuán)隊(duì)為了快檢出HCV的感染者,他們將分離得到HCV進(jìn)行處理后,用其RNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄后再進(jìn)行PCR擴(kuò)增(如圖所示),并迅速研制出核酸診斷試劑盒?;卮鹣铝袉?wèn)題:
(1)過(guò)程①由RNA逆轉(zhuǎn)錄成DNA的原料是脫氧核苷酸脫氧核苷酸,過(guò)程③PCR利用DNA雙鏈復(fù)制DNA雙鏈復(fù)制的原理,將DNA的核苷酸序列不斷地加以復(fù)制。
(2)過(guò)程③中,在獲得單鏈模板的方式上,PCR擴(kuò)增與體內(nèi)DNA復(fù)制不同,前者通過(guò)高溫高溫解開(kāi)雙鏈,后者通過(guò)解旋酶解旋酶解開(kāi)雙鏈。
(3)進(jìn)行PCR時(shí),除了在反應(yīng)體系中加入RNA、逆轉(zhuǎn)錄酶、dNTP、緩沖溶液外,還必須加入耐高溫的DNA聚合酶(Taq酶)和引物耐高溫的DNA聚合酶(Taq酶)和引物。該反應(yīng)體系中,逆轉(zhuǎn)錄酶不能在每次循環(huán)中都發(fā)揮作用,原因是PCR反應(yīng)體系加熱至95℃時(shí),逆轉(zhuǎn)錄酶變性失活PCR反應(yīng)體系加熱至95℃時(shí),逆轉(zhuǎn)錄酶變性失活。
(4)假設(shè)在PCR反應(yīng)中,只有一個(gè)DNA片段作為模板,請(qǐng)計(jì)算在5次循環(huán)后,反應(yīng)物中大約有3232個(gè)這樣的DNA片段。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】脫氧核苷酸;DNA雙鏈復(fù)制;高溫;解旋酶;耐高溫的DNA聚合酶(Taq酶)和引物;PCR反應(yīng)體系加熱至95℃時(shí),逆轉(zhuǎn)錄酶變性失活;32
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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