研究人員將大麥細胞的LTP1基因?qū)肫【平湍妇?，獲得的啤酒酵母菌可產(chǎn)生LTP1蛋白，并釀出泡沫更加豐富的啤酒，如圖為轉(zhuǎn)基因啤酒酵母的生產(chǎn)過程。回答下列問題：
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（1）已知DNA復制時子鏈的延伸方向是5'→3'，圖1中A、B、C、D在不同情況下均可以作為引物，用PCR技術(shù)擴增LTP1基因時應該選用

B、C

B、C

作為引物。
（2）

構(gòu)建基因表達載體

構(gòu)建基因表達載體

是實施基因工程的核心。圖2中的B為質(zhì)粒，質(zhì)粒和LTP1基因結(jié)合形成重組質(zhì)粒C。重組質(zhì)粒C在受體細胞中能夠穩(wěn)定存在并發(fā)揮作用，在LTP1基因的首端必須具有

啟動子

啟動子

，尾端必須具有終止子，還必須含有標記基因和目的基因。
（3）為檢測目的基因在受體細胞基因組中的整合情況，首先采用DNA分子雜交技術(shù)檢測LTP1基因是否導入成功，需要從轉(zhuǎn)基因啤酒酵母中提取DNA，用

標記的目的基因（LTP1基因）

標記的目的基因（LTP1基因）

作探針與之雜交。
（4）為檢測轉(zhuǎn)基因啤酒酵母是否產(chǎn)生LTP1蛋白，除檢測LTP1蛋白是否產(chǎn)生及含量外，還可觀察轉(zhuǎn)基因啤酒酵母所釀啤酒的

泡沫豐富程度

泡沫豐富程度

進行判斷，若能檢測到LTP1蛋白，但效果差，可能的原因是

LTP1基因表達效率低，合成的LTP1蛋白少

LTP1基因表達效率低，合成的LTP1蛋白少

；若經(jīng)檢測確定細胞中無LTP1蛋白，可采用PCR技術(shù)檢測細胞中的RNA，如果能檢測到mRNA，則可能是

未能正常翻譯

未能正常翻譯

；如果檢測后確定細胞中無LTP1蛋白的mRNA，但之前能檢測到LTP1基因，則LTP1基因未能正常轉(zhuǎn)錄的原因可能是

LTP1基因反向插入質(zhì)粒DNA分子中

LTP1基因反向插入質(zhì)粒DNA分子中

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