“多發(fā)性骨性連接綜合征”是由編碼成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（FGF9）的基因突變所致，患者FGF9基因中某堿基對(duì)發(fā)生替換，使FGF9中相應(yīng)的氨基酸發(fā)生替換。科研人員欲利用基因工程等技術(shù)獲得含有該突變基因的模型小鼠，用來(lái)研究該病的發(fā)病機(jī)理。圖1表示FGF9cDNA（由FGF9基因轉(zhuǎn)錄得到的mRNA逆轉(zhuǎn)錄而來(lái)）進(jìn)行定點(diǎn)突變得到突變型FGF9cDNA的流程，圖2為研究中所用的質(zhì)粒（SpeⅠ、HindⅢ、SmalⅠ和BglⅡ分別代表相應(yīng)的限制酶切割位點(diǎn)，以上限制酶切割產(chǎn)生的粘性末端不同）。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）圖1虛線(xiàn)方框中的a鏈與d鏈在延伸過(guò)程中的作用是：既可作為 模板模板又可以起到相當(dāng)于 引物引物的作用，使 耐高溫的DNA聚合耐高溫的DNA聚合酶能夠從a鏈與d鏈的3’端開(kāi)始連接脫氧核苷酸。經(jīng)PCR后獲得的產(chǎn)物一般通過(guò) 瓊脂糖凝膠電泳瓊脂糖凝膠電泳來(lái)鑒定。
（2）基因王程操作的核心步驟是 基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因表達(dá)載體的構(gòu)建。圖2質(zhì)粒中的C序列是 啟動(dòng)子啟動(dòng)子，它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位。圖1中突變型FGF9cDNA的a鏈所在的DNA單鏈為轉(zhuǎn)錄的模板鏈，則引物1和引物4的5'端需分別添加 HindⅢ和SpeⅠHindⅢ和SpeⅠ酶的識(shí)別序列，才能與圖2中的質(zhì)粒正確連接。
（3）將構(gòu)建的重組DNA分子通過(guò) 顯微注射顯微注射技術(shù)導(dǎo)入受精卵，再經(jīng) 胚胎移植胚胎移植（答1點(diǎn)即可）等技術(shù)使其發(fā)育成模型小鼠。
（4）科研人員發(fā)現(xiàn)，已轉(zhuǎn)入突變型FGF9cDNA的模型小鼠并未表現(xiàn)出“多發(fā)性骨性連接綜合征”，從分子水平上尋找原因需采用的技術(shù)有 PCR、抗原-抗體雜交技術(shù)PCR、抗原-抗體雜交技術(shù)。（答出2點(diǎn)）
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】模板；引物；耐高溫的DNA聚合；瓊脂糖凝膠電泳；基因表達(dá)載體的構(gòu)建；啟動(dòng)子；HindⅢ和SpeⅠ；顯微注射；胚胎移植；PCR、抗原-抗體雜交技術(shù)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：49引用：4難度：0.5
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
2．煙草是我國(guó)一些地區(qū)的經(jīng)濟(jì)作物之一，提高煙草質(zhì)量有利于提高經(jīng)濟(jì)收入。我國(guó)科研團(tuán)隊(duì)研究了一種轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種，抗鹽基因的結(jié)構(gòu)和獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過(guò)程（①～⑤）如圖所示?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過(guò)程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項(xiàng)）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對(duì)目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過(guò)程（填序號(hào)）。過(guò)程②③采用的方法是。
（4）⑤過(guò)程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過(guò)程中，這兩種植物激素的比例會(huì)發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
3．如表為5種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)，如圖為某種質(zhì)粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點(diǎn)。現(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中，以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說(shuō)法正確的是（ ?。?
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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