蜘蛛絲（絲蛋白）有著超強的抗張強度?？芍瞥煞缽棻承?、人造韌帶等。蜘蛛通過在腹部的腺體生成蜘蛛絲，并使用一種名為“噴絲頭”的器官將蛛絲排出體外。由于蜘蛛會互相攻擊，吃掉同類，因此無法像蠶絲一樣通過養(yǎng)殖大量生產(chǎn)。美國科學家蘭迪?萊維斯把一些蜘蛛DNA轉(zhuǎn)置到山羊的DNA中，使其產(chǎn)出的羊奶經(jīng)過提煉、干燥后變成與蜘蛛絲質(zhì)地一模一樣的絲綢。如圖是創(chuàng)造“蜘蛛羊”的過程，回答下列問題：
（1）從 蜘蛛腹部腺體蜘蛛腹部腺體細胞中提取mRNA，反轉(zhuǎn)錄為cDNA，根據(jù) 蛛絲蛋白基因兩端的已知脫氧核苷酸序列蛛絲蛋白基因兩端的已知脫氧核苷酸序列設(shè)計引物，獲取和擴增目的基因，通常采用 瓊脂糖凝膠電泳瓊脂糖凝膠電泳的方法來鑒定其擴增產(chǎn)物。
（2）甲過程需用到的工具有 限制酶、DNA連接酶、載體限制酶、DNA連接酶、載體（填工具名稱）。對X中的啟動子的要求是 能使蜘蛛絲蛋白基因在乳腺細胞中特異性表達能使蜘蛛絲蛋白基因在乳腺細胞中特異性表達。
（3）科學家將蜘蛛牽絲蛋白基因整合到細毛羊胎兒成纖維細胞中，并用此細胞作為核供體，結(jié)合核移植技術(shù)，成功獲得了能合成蛛絲蛋白的轉(zhuǎn)基因細毛羊。
①對成纖維細胞進行體外傳代培養(yǎng)時，需用胰蛋白酶處理貼壁細胞，使之分散成單個細胞，再用 離心法離心法法收集細胞，之后再繼續(xù)分瓶培養(yǎng)。
②用細毛羊卵母細胞作為核移植的受體，在核移植之前必須先對卵母細胞進行的操作是培養(yǎng)至 MⅡMⅡ時期，通過顯微操作去核法去除卵母細胞的細胞“核”，該“核”實質(zhì)為 紡錘體-染色體復合物紡錘體-染色體復合物。
③采用羊胎兒成纖維細胞進行轉(zhuǎn)基因體細胞克隆的優(yōu)勢在于可以獲得 可以獲得大量遺傳物質(zhì)相同的后代可以獲得大量遺傳物質(zhì)相同的后代。為了提高已有重組胚胎的利用率，可采用 胚胎分割胚胎分割技術(shù)。
【答案】蜘蛛腹部腺體；蛛絲蛋白基因兩端的已知脫氧核苷酸序列；瓊脂糖凝膠電泳；限制酶、DNA連接酶、載體；能使蜘蛛絲蛋白基因在乳腺細胞中特異性表達；離心法；MⅡ；紡錘體-染色體復合物；可以獲得大量遺傳物質(zhì)相同的后代；胚胎分割
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復制發(fā)布。
發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：51引用：2難度：0.5
相似題
-
1．學習以下材料，回答（1）～（4）題。
利用抑制性tRNA進行無義突變遺傳病的治療
無義突變是由于某個堿基的改變使代表某種氨基酸的密碼子突變?yōu)榻K止密碼子（UAA、UAG或UGA），從而使肽鏈合成提前終止，造成蛋白質(zhì)的功能改變，引發(fā)相關(guān)疾病。約有10%～15%的人類基因相關(guān)遺傳疾病是由無義突變引發(fā)的。常規(guī)的基因治療是將正?；虻腸DNA序列或是有治療價值的基因（如CRISPR-Cas9相關(guān)的基因編輯工具）通過一定的方式導入人體靶細胞內(nèi)，達到替代或修復缺陷基因、治療疾病的目的。導入基因插入位置不當、過高或過低表達，都可能會導致副作用。盡管基因編輯可以實現(xiàn)生理水平的基因表達，但基因編輯工具引入外源蛋白可能引發(fā)強烈的免疫反應仍然是巨大的挑戰(zhàn)。
抑制性tRNA（sup-tRNA）由天然tRNA改造而來，它的反密碼子通過堿基配對原則可以識別無義突變的終止密碼子，使得mRNA在翻譯至無義突變位點時不啟動翻譯終止而是繼續(xù)向后進行翻譯，獲得有功能的全長蛋白。
I型黏多糖貯積癥的病因，是相關(guān)基因發(fā)生無義突變，產(chǎn)生終止密碼子UAG。研究者構(gòu)建小鼠該突變基因mldua和Flag基因融合的載體（圖1），以及針對該無義突變設(shè)計的sup-tRNA表達載體（產(chǎn)生的sup-tRNA能夠識別UAG并攜帶酪氨酸Tyr,簡寫作sup-tRNATyr），將其導入細胞進行研究，發(fā)現(xiàn)與具有相似作用的化合物G418比較，sup--tRNA的作用更加顯著（圖2）；進一步利用重組腺相關(guān)病毒作為載體將sup-tRNA導入患病小鼠模型中，實驗顯示能夠降低黏多糖過度積存，實現(xiàn)對該病癥的有效治療，其療效可以持續(xù)半年以上。
從整體來看，G418在促進跨越無義突變位點繼續(xù)翻譯時引入的氨基酸較為隨機，而sup-tRNA引入的氨基酸較為單一，且不會影響內(nèi)源tRNA穩(wěn)態(tài)，所以sup-tRNA在個體治療中具有很高的安全性，因而在未來基因突變引起的疾病相關(guān)治療中具有非常大的應用前景。
（1）侵染時，作為載體的重組腺相關(guān)病毒與靶細胞膜上的發(fā)生識別，引發(fā)內(nèi)吞，進入細胞后釋放單鏈DNA作為模板，利用宿主細胞的催化合成其互補DNA鏈，再經(jīng)過過程產(chǎn)生sup-tRNA。
（2）除了引入的氨基酸較為單一，不影響內(nèi)源tRNA穩(wěn)態(tài)，我們還可推斷，用于治療的sup-tRNA在正常終止密碼子處（填“能”或“不能”）繼續(xù)往后翻譯，具有很高的安全性。
（3）研究者構(gòu)建mldua突變基因和Flag基因融合的載體，目的是通過檢測來確定是否跨越無義突變位點繼續(xù)向后翻譯。實驗結(jié)果表明，相比于化合物G418，sup-tRNA在促進無義突變位點的翻譯方面更加有效，支持這一結(jié)論的依據(jù)是：。
（4）有文獻報道，已在近1000個不同的人類基因中發(fā)現(xiàn)了7500多個無義突變。常規(guī)的基因治療需要為每種疾病設(shè)計獨特的治療策略，這將是一項耗費驚人的項目。據(jù)此說明sup-tRNA的應用價值。發(fā)布：2025/1/3 8:0:1組卷：27引用：1難度：0.6 -
2．人類基因組計劃測定了人體的24條染色體，這24條染色體是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 0:30:1組卷：112引用：7難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，自然界有些植物能產(chǎn)生幾丁質(zhì)酶催化幾丁質(zhì)水解從而抵抗真菌感染。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入沒有抗性的植物體內(nèi)，可增強其抗真菌的能力。如圖表示為獲取幾丁質(zhì)酶基因而建立cDNA文庫的過程。
（1）圖示以mRNA為材料通過法獲得cDNA，該方法依據(jù)的原理是，通過這種方法獲得的基因中因缺乏和結(jié)構(gòu)，導致將其直接導入受體細胞中不能復制和表達。
（2）與選用老葉相比，選用嫩葉更容易提取到mRNA，原因是，且提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（3）將從cDNA文庫中獲得的幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體用酶和DNA連接處理后連接起來，構(gòu)建基因表達載體，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：5引用：1難度：0.7
相關(guān)試卷