甜玉米與普通玉米相比，甜玉米中可溶性糖向淀粉的轉(zhuǎn)化較慢含可溶性糖量高，汁多質(zhì)脆，富含多種維生素。為了使甜玉米更富有生產(chǎn)應(yīng)用價(jià)值，科研人員通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出了超量表達(dá)P蛋白轉(zhuǎn)基因甜玉米。在超量表達(dá)P基因載體的構(gòu)建中，所用DNA片段和Ti質(zhì)粒的酶切位點(diǎn)如圖1所示，P蛋白在玉米株系的表達(dá)量如圖2所示?；卮鹣铝袉?wèn)題：

（1）強(qiáng)啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，能被

RNA聚合酶

RNA聚合酶

識(shí)別并結(jié)合，驅(qū)動(dòng)基因的持續(xù)轉(zhuǎn)錄。為使P基因在玉米植株中超量表達(dá)，應(yīng)優(yōu)先選用

BamHⅠ和SacⅠ

BamHⅠ和SacⅠ

酶組合，將片段和Ti質(zhì)粒切開(kāi)后構(gòu)建重組表達(dá)載體。TDNA在該實(shí)驗(yàn)中的作用是

將強(qiáng)啟動(dòng)子和P基因帶入玉米細(xì)胞并整合到玉米細(xì)胞染色體DNA上

將強(qiáng)啟動(dòng)子和P基因帶入玉米細(xì)胞并整合到玉米細(xì)胞染色體DNA上

。
（2）將農(nóng)桿菌液浸泡過(guò)的玉米愈傷組織進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中需加入

潮霉素

潮霉素

進(jìn)行篩選，篩選出的愈傷組織

再分化

再分化

形成叢芽，最終獲得多個(gè)玉米株系a₁、a₂、a₃、a₄。通過(guò)對(duì)a₁、a₂、a₃、a₄四株甜玉米株系的蛋白質(zhì)表達(dá)量進(jìn)行測(cè)定結(jié)果如圖2，其中a₄株系P蛋白表達(dá)量較低的原因可能是

a₄株系玉米中可能沒(méi)有導(dǎo)入目的基因或目的基因未表達(dá)

a₄株系玉米中可能沒(méi)有導(dǎo)入目的基因或目的基因未表達(dá)

。
（3）科研人員將野生型玉米和a₁株系玉米在甲、乙兩種條件下進(jìn)行種植，一段時(shí)間后，測(cè)量地上部分鮮重，獲得相對(duì)生物量如圖3所示。實(shí)驗(yàn)中的自變量是

CO₂濃度和植株類型

CO₂濃度和植株類型

。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，從光合作用的角度分析其原因是

干旱條件下，a₁株系轉(zhuǎn)基因玉米CO₂的利用率更高，光合效率更高

干旱條件下，a₁株系轉(zhuǎn)基因玉米CO₂的利用率更高，光合效率更高

。
（4）為了進(jìn)一步提高甜玉米中淀粉的含量，科研人員提出通過(guò)降低淀粉酶合成有關(guān)基因的表達(dá)實(shí)現(xiàn)生產(chǎn)目標(biāo)。研究人員研究發(fā)現(xiàn)嗎啉反義寡核苷酸是一種RNA剪接抑制劑，將其注入植物細(xì)胞內(nèi)會(huì)使基因表達(dá)受阻，科研人員將嗎啉反義寡核苷酸導(dǎo)入玉米的受精卵中起到明顯效果。針對(duì)它的具體作用，科研人員提出以下假說(shuō)：
假說(shuō)1：導(dǎo)致RNA前體上內(nèi)含子1的對(duì)應(yīng)序列不能被剪。
假說(shuō)2：導(dǎo)致RNA前體上內(nèi)含子1和外顯子2的對(duì)應(yīng)序列同時(shí)被剪切。
為了驗(yàn)證上述假說(shuō)，分別從受精卵發(fā)育后3天的實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組胚細(xì)胞中提取

總RNA

總RNA

，逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA。若假說(shuō)1成立，使用圖4所示引物2和引物4進(jìn)行PCR后電泳的結(jié)果為

AD

AD

（填字母）。
A.實(shí)驗(yàn)組有目的條帶
B.實(shí)驗(yàn)組無(wú)目的條帶
C.對(duì)照組有目的條帶
D.對(duì)照組無(wú)目的條帶
若要證明假說(shuō)2成立，需要選擇如圖所4示引物

3和4

3和4

進(jìn)行PCR。