馬鈴薯Y病毒(PVY)是危害馬鈴薯的重要病毒之一,給馬鈴薯種植業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失??蒲腥藛T利用PVY粒子免疫小鼠,獲得了PVY單克隆抗體以用于PVY檢測(cè)?;卮鹣铝袉?wèn)題:
(1)科研人員為了鑒定植物細(xì)胞中的PVY,提取感染PVY植物的總RNA并放入反應(yīng)體系中,在 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下獲得cDNA,利用PCR技術(shù)擴(kuò)增PVY特定基因的前提是 合成引物合成引物,擴(kuò)增過(guò)程中,每一輪循環(huán)要經(jīng)過(guò) 變性、復(fù)性(又稱退火)和延伸變性、復(fù)性(又稱退火)和延伸三個(gè)階段。
(2)在制備PVY單克隆抗體的過(guò)程中,科研人員用PVY粒子多次免疫小鼠,目的是 獲得足夠數(shù)量的B細(xì)胞獲得足夠數(shù)量的B細(xì)胞。對(duì)選擇性培養(yǎng)獲得的雜交瘤細(xì)胞還需要進(jìn)一步篩選,篩選方法是 克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)。
(3)科研人員篩選獲得了20B2和25C2兩種能產(chǎn)生抗PVY單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞,并將其單克隆抗體分別與健康馬鈴薯植株的葉片組織、感染PVY馬鈴薯植株的葉片組織進(jìn)行抗原一抗體雜交檢測(cè),結(jié)果如圖所示,其中健康馬鈴薯植株的編號(hào)是 ③和④③和④,判斷依據(jù)是 ③和④植株不會(huì)和PVY抗體發(fā)生抗原—抗體雜交反應(yīng)③和④植株不會(huì)和PVY抗體發(fā)生抗原—抗體雜交反應(yīng)。這兩種單克隆抗體所結(jié)合的抗原蛋白不同,原因可能是 兩種單克隆抗體是在PVY不同抗原的刺激下產(chǎn)生的兩種單克隆抗體是在PVY不同抗原的刺激下產(chǎn)生的。
【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用;DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定.
【答案】逆轉(zhuǎn)錄;合成引物;變性、復(fù)性(又稱退火)和延伸;獲得足夠數(shù)量的B細(xì)胞;克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè);③和④;③和④植株不會(huì)和PVY抗體發(fā)生抗原—抗體雜交反應(yīng);兩種單克隆抗體是在PVY不同抗原的刺激下產(chǎn)生的
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:12引用:3難度:0.6
相似題
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1.CD47是一種跨膜糖蛋白,它可與巨噬細(xì)胞表面的信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合,從而抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞高1.6~5倍,導(dǎo)致吞噬細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱??茖W(xué)家推測(cè),抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用,為此他們按照如圖流程進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。下列敘述正確的是( ?。?br />
發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:7引用:3難度:0.6 -
2.使用高效的細(xì)胞毒素藥物進(jìn)行化療可以有效殺傷腫瘤細(xì)胞但細(xì)胞毒素沒有特異性,在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)還會(huì)對(duì)健康細(xì)胞造成傷害。這限制了它在臨床上的應(yīng)用。抗體一藥物偶聯(lián)物(ADC)通過(guò)將細(xì)胞毒素與能特異性識(shí)別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合,實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷ADC通常由抗體、接頭和藥物(如細(xì)胞毒素)三部分組成,它的作用機(jī)制如圖所示。下列敘述正確的是( ?。?br />
發(fā)布:2024/12/31 3:30:1組卷:18引用:2難度:0.7 -
3.雙特異性抗體是指一個(gè)抗體分子可以與兩個(gè)不同抗原或同一抗原的兩個(gè)不同抗原表位相結(jié)合,目前最常利用雜交瘤雜交法來(lái)制備。長(zhǎng)春花是原產(chǎn)于非洲東海岸的野生花卉,其所含的長(zhǎng)春堿具有良好的抗腫瘤作用。圖1是某雙特異性抗體作用圖。圖2是科研人員通過(guò)雜交—雜交瘤細(xì)胞技術(shù)(免疫的B淋巴細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞雜交技術(shù))生產(chǎn)能同時(shí)識(shí)別癌胚抗原和長(zhǎng)春堿的雙特異性單克隆抗體的部分過(guò)程。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題:
(1)與植物體細(xì)胞雜交相比,圖2中過(guò)程②特有的誘導(dǎo)融合的方法是
(2)對(duì)③篩選出的雜交瘤細(xì)胞,還需進(jìn)行
(3)圖2中①步驟注射癌胚抗原的目的是
(4)與直接使用長(zhǎng)春堿相比,將長(zhǎng)春堿與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥,對(duì)人體的副作用更小,原因是發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:21引用:4難度:0.5
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