IKK激酶參與動物體內(nèi)免疫細(xì)胞的分化。臨床上發(fā)現(xiàn)某重癥聯(lián)合免疫缺陷（SCID）患兒IKK基因編碼區(qū)第1183位堿基T突變?yōu)镃，導(dǎo)致IKK上第395位酪氨酸被組氨酸代替。為研究該患兒發(fā)病機(jī)制，研究人員利用純合野生鼠應(yīng)用大引物PCR定點(diǎn)誘變技術(shù)培育出SCID模型小鼠（純合），主要過程如圖甲、乙。分析回答下列問題：
（1）在PCR反應(yīng)體系中，除需加入引物、IKK基因、緩沖液、Mg²⁺等外，還需加入

Taq酶（耐高溫DNA聚合酶/熱穩(wěn)定DNA聚合酶）、4種脫氧核苷酸（或dNTP）

Taq酶（耐高溫DNA聚合酶/熱穩(wěn)定DNA聚合酶）、4種脫氧核苷酸（或dNTP）

等。
（2）在圖甲獲取突變基因過程中，需要以下3種引物：

引物A	5'-CCCAACCGGAAAGTGTCA-3' （下劃線字母為突變堿基）
引物B	5'-TAAGCTTCGAACATCCTA-3' （下劃線部分為限制酶HindⅢ識別序列）
引物C	5'-GTGAGCTCGCTGCCCCAA-3' （下劃線部分為限制酶SacⅠ識別序列）

則PCR₁中使用的引物有

引物A和引物B

引物A和引物B

，PCR₂中使用的引物有

引物C

引物C

和圖中大引物的

②

②

（填“①”或“②”）鏈。
（3）PCR的反應(yīng)程序：94℃3min；94℃30s,58℃30s,72℃50s,30個(gè)循環(huán)。在循環(huán)之前的94℃3min處理為預(yù)變性；循環(huán)中72℃處理的目的是

使4種脫氧核苷酸在耐高溫的DNA聚合酶作用下，合成新的DNA鏈

使4種脫氧核苷酸在耐高溫的DNA聚合酶作用下，合成新的DNA鏈

。
（4）研究人員經(jīng)鑒定、篩選獲得一只轉(zhuǎn)基因雜合鼠F₀，并確認(rèn)突變基因已經(jīng)穩(wěn)定同源替代IKK基因，請你設(shè)計(jì)完成獲得SCID模型鼠的實(shí)驗(yàn)步驟：
①雜交親本：

F₀與野生鼠

F₀與野生鼠

，雜交得F₁；
②F₁雌、雄鼠隨機(jī)交配得F₂；
③提取F₂每只小鼠的基因組DNA，采用分子生物學(xué)方法，利用IKK基因探針和突變基因探針進(jìn)行篩選，則

IKK基因探針檢測未出現(xiàn)雜交帶，突變基因探針檢測出現(xiàn)雜交帶

IKK基因探針檢測未出現(xiàn)雜交帶，突變基因探針檢測出現(xiàn)雜交帶

的為模型鼠。