當前位置： 2022-2023學(xué)年廣東省湛江市高二（下）期末生物試卷> 試題詳情

雞干擾素是一種具有高效和廣譜抗病毒作用的細胞因子，廣泛用于動物領(lǐng)域的抗病毒治療?？蒲腥藛T將雞干擾素基因作為目的基因，構(gòu)建基因表達載體，通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法導(dǎo)入煙草，以獲得抗病毒煙草。如圖為科研人員制備能合成雞干擾素的煙草愈傷組織細胞的流程，①-④表示相關(guān)的操作，兩種限制酶的識別序列及切割位點如表所示。請回答下列問題：

限制酶識別序列和切割位點

EcoRⅠ

BamHⅠ

（1）步驟①中，利用PCR技術(shù)擴增干擾素基因時，設(shè)計引物序列的主要依據(jù)是
雞干擾素基因兩端的部分核苷酸序列
雞干擾素基因兩端的部分核苷酸序列
?？蒲腥藛T還在兩種引物的一端分別加上了
GAATTC
GAATTC
和
GGATCC
GGATCC
序列，以便于后續(xù)的剪切和連接。
（2）步驟②所構(gòu)建的基因表達載體中末標注出的必需元件還有
復(fù)制原點
復(fù)制原點
，步驟③中需先用
Ca²⁺
Ca²⁺
處理農(nóng)桿菌以便將基因表達載體導(dǎo)入細胞。
（3）步驟④中，科研人員提取愈傷組織細胞的RNA后，先通過逆轉(zhuǎn)錄獲得DNA，再通過PCR擴增制備探針，若最終未能檢測出干擾素基因，其可能原因是
雞干擾素基因未能導(dǎo)入煙草愈傷組織細胞（或?qū)霟煵萦鷤M織細胞的雞干擾素基因未能轉(zhuǎn)錄）
雞干擾素基因未能導(dǎo)入煙草愈傷組織細胞（或?qū)霟煵萦鷤M織細胞的雞干擾素基因未能轉(zhuǎn)錄）
。
（4）用煙草花葉病毒對獲得的轉(zhuǎn)基因煙草和普通煙草進行接種實驗，接種后第19天對照組植株進入病情指數(shù)（植物受病毒侵染的嚴重程度）為100的平臺期，而轉(zhuǎn)基因植株在第
22
22
天才進入平臺期，但此時的病情指數(shù)為79，說明轉(zhuǎn)基因煙草植株對病毒的侵染表現(xiàn)出一定的抗性，但抗性較低，可能的原因有
實驗得到的干擾素表達量較低，未能很好啟動機體產(chǎn)生抗性
實驗得到的干擾素表達量較低，未能很好啟動機體產(chǎn)生抗性
。

【答案】雞干擾素基因兩端的部分核苷酸序列；GAATTC；GGATCC；復(fù)制原點；Ca²⁺；雞干擾素基因未能導(dǎo)入煙草愈傷組織細胞（或?qū)霟煵萦鷤M織細胞的雞干擾素基因未能轉(zhuǎn)錄）；22；實驗得到的干擾素表達量較低，未能很好啟動機體產(chǎn)生抗性

【解答】

【點評】

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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：6引用：3難度：0.6

相似題

1．PCR是利用體內(nèi)DNA復(fù)制的原理，進行生物體外復(fù)制特定 DNA片段的核酸合成技術(shù)。請回答有關(guān)問題：
（1）PCR反應(yīng)的基本步驟是變性、

、

。
（2）科學(xué)家研究發(fā)現(xiàn) DNA聚合酶只能催化

方向的聚合反應(yīng)。圖1表示細胞內(nèi)染色體 DNA的半保留復(fù)制過程，有一條子鏈是先合成短的DNA片段（稱為岡崎片段），再形成較長的分子，可推測參與以上過程的酶有DNA聚合酶、

、

。在PCR過程中無岡崎片段形成，原因是細胞內(nèi)染色體 DNA的復(fù)制過程特點是

，PCR過程的特點是

。
（3）雙脫氧核苷三磷酸（ddNTP）與脫氧核苷三磷酸（dNTP）的結(jié)構(gòu)如圖2所示。已知 ddNTP按堿基互補配對的方式加到正在復(fù)制的子鏈中后，子鏈的延伸立即終止?，F(xiàn)有一些序列為5'-GCCTAAGATCGCA-3'的DNA分子單鏈片段，通過PCR技術(shù)獲得以堿基“C”為末端（3'為堿基C）不同長度的子鏈DNA片段，將以上子鏈 DNA片段進行電泳分離可得到

種不同長度的子鏈 DNA片段。為使實驗順利進行，在PCR反應(yīng)管中除了單鏈模板、引物、DNA 聚合酶和相應(yīng)的緩沖液等物質(zhì)外，還需要加入下列哪組原料

。
A.dGTP，dATP，dTTP
B.dGTP、dATP、dTTP、dCTP、ddCTP
C.dGTP，dATP，dTTP，dCTP
D.ddGTP，ddATP，ddTTP，ddCTP
（4）如圖3為形成單鏈DNA后，再進行PCR擴增示意圖。

催化①過程的酶是

；核酸酶H的作用是

。如果某RNA單鏈中一共有80個堿基，其中C有15個，A與U之和占該鏈堿基含量的40%，經(jīng)過以上若干過程后共獲得8個雙鏈 DNA，此過程中至少需加入G參與組成的核苷酸數(shù)量為

（以上過程不考慮引物）。
發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：19引用：1難度：0.7
解析
2．PCR是利用體內(nèi)DNA復(fù)制的原理，進行生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)。請回答有關(guān)問題：

（1）PCR反應(yīng)的基本步驟是變性、復(fù)性、

。
（2）雙脫氧核苷三磷酸（ddNTP）與脫氧核苷三磷酸（dNTP）的結(jié)構(gòu)如圖2所示。已知ddNTP按堿基互補配對的方式加到正在復(fù)制的子鏈中后，子鏈的延伸立即終止。現(xiàn)主有一些序列為5'-GCCTAAGATCGCA-3'的DNA分子單鏈片段，通過PCR技術(shù)獲得以堿基“C”為末端（3'為堿基C）不同長度的子鏈DNA片段，將以上子鏈DNA片段進行電泳分離可得到

種不同長度的子鏈DNA片段。為使實驗順利進行，在PCR反應(yīng)管中除了單鏈模板、引物、DNA聚合酶和相應(yīng)的緩沖液等物質(zhì)外，還需要加入下列哪組原料

。
A．dGTP、dATP、dTTP
B．dGTR、dATP、dTTP、dCTP、ddCTP
C．dGTP、dATP、dTTP、dCTP
D．ddGTP、ddATP、ddTTP、ddCTP
（3）科學(xué)家研究發(fā)現(xiàn)DNA聚合酶只能催化

方向的聚合反應(yīng)。圖1表示細胞內(nèi)染色體DNA的復(fù)制過程，有一條子鏈是先合成短的DNA片段（稱為岡崎片段），再形成較長的分子，可推測參與以上過程的酶有DNA連接酶

、

。在PCR過程中無岡崎片段形成，原因是細胞內(nèi)染色體DNA的復(fù)制過程特點是

，PCR過程的特點是

。
發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：12引用：1難度：0.7
解析
3．Sanger法DNA測序技術(shù)的核心原理：由于雙脫氧核苷酸（ddNTP）的2'和3'都不含羥基，其在DNA的合成過程中不能形成磷酸二酯鍵，因此可以中斷DNA分子合成反應(yīng)。在四個含有4種脫氧核苷酸（dNTP）的DNA體外合成反應(yīng)體系中分別加入一定比例帶有放射性同位素標記的ddNTP（分別為：ddATP，ddCTP，ddGTP和ddTTP），在PCR過程中復(fù)制隨機終止，產(chǎn)生四組不同長度的一系列終止處帶有標記的DNA片段。然后在變性凝膠（加入尿素等堿性物質(zhì)）上進行電泳和放射自顯影后，可以根據(jù)電泳帶的位置確定待測分子的DNA序列，具體過程見圖。
注：ddA是ddATP的縮寫形式。

（1）如圖1中Ⅰ過程橫線①中應(yīng)該加入的物質(zhì)是

，dNTP中dATP與ATP在組成上的區(qū)別是

，為什么該過程中需要添加引物？
（2）材料中提到“在變性凝膠上進行電泳……”，請解釋“變性”

，為什么要變性處理？

。
（3）如果電泳結(jié)果如圖2所示，請寫出待測DNA分子的序列

。
（4）某同學(xué)要通過PCR技術(shù)獲得被³²P標記且以堿基“C”為末端、不同長度的子鏈DNA片段，在反應(yīng)管中已經(jīng)有模板、引物、酶和相應(yīng)緩沖液等等，還需加入哪些原料

。
發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：16引用：1難度：0.7
解析

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限制酶	識別序列和切割位點
EcoRⅠ
BamHⅠ