回答下列（一）、（二）小題：
（一）衢州盛產(chǎn)椪柑，某興趣小組想深度開發(fā)椪柑，進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn)。
（1）開發(fā)桔子汁。為了提高出汁率和澄清度，可以在制作桔子汁時加入

果膠酶和果膠甲酯

果膠酶和果膠甲酯

酶（寫兩種）以分解果膠。生產(chǎn)果膠酶可從黑曲霉或蘋果青霉中提取，下列適于黑曲霉或蘋果青霉擴(kuò)大培養(yǎng)的培養(yǎng)基是

D

D

（A．MS培養(yǎng)基  B．尿素固體培養(yǎng)基   C．蛋白胨和酵母提取物培養(yǎng)基   D．添加蔗糖的豆芽汁培養(yǎng)基）。由于果膠酶溶于水，不利于重復(fù)使用，可通過物理或化學(xué)方法將果膠酶固定在某種介質(zhì)上，使之成為不溶于水而又有

酶活性

酶活性

的制劑。
（2）開發(fā)桔子酒。桔子在釀酒時需去果皮、去囊衣和果核，因?yàn)槠渲泻锌辔段镔|(zhì)，所以需要額外添加酵母菌，因?yàn)樽匀话l(fā)酵過程中，野生型天然酵母菌主要附著在

桔皮

桔皮

（填桔子的結(jié)構(gòu)）。用桔子汁制作桔子酒，以桔子汁為原料，加入一定比例的蔗糖目的是

提高果酒的酒精和糖的含量

提高果酒的酒精和糖的含量

。最后倒入酵母懸液，混勻，加蓋；發(fā)酵開始時，由于微生物的需氧呼吸會使發(fā)酵瓶內(nèi)出現(xiàn)

負(fù)壓

負(fù)壓

，原因是

需氧呼吸消耗氧氣，產(chǎn)生的二氧化碳易溶于水

需氧呼吸消耗氧氣，產(chǎn)生的二氧化碳易溶于水

。
（二）開發(fā)耐鹽品種的椪柑，以利于沿海地區(qū)栽種。
（1）為了獲得耐鹽基因，可以從已知耐鹽植物星星草中獲取耐鹽基因，也可以根據(jù)耐鹽堿蛋白質(zhì)的氨基酸序列出發(fā)，推測出控制合成該蛋白基因的

核苷酸序列

核苷酸序列

，用化學(xué)合成法合成目的基因，然后用

PCR

PCR

技術(shù)擴(kuò)增目的基因。
（2）椪柑的轉(zhuǎn)化過程：將重組Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌時，可以用

CaCl₂溶液

CaCl₂溶液

處理農(nóng)桿菌，使重組Ti質(zhì)粒易于導(dǎo)入；之后耐鹽基因通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)入椪柑植株的愈傷組織，Ti質(zhì)粒上的

控制質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)移的

控制質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)移的

基因可以將抗鹽基因整合到椪柑染色體DNA上，通過植物組織培養(yǎng)，可再生出新的植株。
（3）要確認(rèn)耐鹽基因在椪柑植株中是否正確表達(dá)，可以檢測此轉(zhuǎn)基因植株中該基因的表達(dá)產(chǎn)物，如果檢測結(jié)果呈陽性，再用

一定濃度的鹽水澆灌

一定濃度的鹽水澆灌

方法從個體水平檢測植株的

耐鹽性

耐鹽性

是否得到提高。
（4）假設(shè)用得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐鹽植株自交，子代中耐鹽與不耐鹽株系的數(shù)量比為15：1，則可以推測有幾個耐鹽基因整合到了染色體上，請用圖表示。（耐鹽基因用A表示）