如圖表示某種綠色熒光蛋白基因表達載體的構(gòu)建過程，綠色熒光蛋白基因有820個堿基對（bp），質(zhì)粒有5369個堿基對（bp）。請據(jù)圖回答問題：
（1）上述基因表達載體的構(gòu)建過程需要的基本工具包括：限制酶、DNA連接酶、運載體限制酶、DNA連接酶、運載體。過程①②用相同的兩種限制酶切割，與單一酶切相比的優(yōu)勢有 可以避免目的基因自身環(huán)化、使目的基因定向插入到運載體中可以避免目的基因自身環(huán)化、使目的基因定向插入到運載體中。
（2）過程②目的基因的擴增可通過PCR技術(shù)實現(xiàn)，進行PCR時除提供DNA母鏈，4種脫氧核苷酸，還需 Taq酶和人工合成的引物Taq酶和人工合成的引物等基本條件（至少填兩個）。PCR可成指數(shù)形式擴增目的基因，每個循環(huán)一般可分為 變性、退火、延伸變性、退火、延伸。
（3）已知圖中質(zhì)粒經(jīng)BamHⅠ、HindⅢ雙酶切后進行電泳，若出現(xiàn)了一條長度為5150bp的DNA條帶，則重組質(zhì)粒的長度為 59705970的DNA片段條帶。
（4）若想獲得發(fā)綠色熒光的小鼠，可將重組質(zhì)粒用 顯微注射顯微注射法導(dǎo)入小鼠的 受精卵受精卵（細胞）中。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】限制酶、DNA連接酶、運載體；可以避免目的基因自身環(huán)化、使目的基因定向插入到運載體中；Taq酶和人工合成的引物；變性、退火、延伸；5970；顯微注射；受精卵
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/10/1 1:0:2組卷：9引用：2難度：0.6
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