當(dāng)前位置： 2023-2024學(xué)年山西省朔州市懷仁一中高三（上）第一次月考生物試卷> 試題詳情

新冠病毒核酸檢測(cè)的原理為實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）檢測(cè)法，技術(shù)流程如圖所示，在PCR擴(kuò)增時(shí)加入能與目的基因（新冠病毒的N基因）結(jié)合的熒光探針，①②③表示相關(guān)步驟?；卮鹣铝袉栴}：

（1）qPCR過程中，需先以RNA為模板合成cDNA，故裝置中需添加酶
逆轉(zhuǎn)錄酶
逆轉(zhuǎn)錄酶
。為確保新冠病毒核酸檢測(cè)的準(zhǔn)確性，在設(shè)計(jì)PCR引物時(shí)必須依據(jù)新冠病毒RNA中的
特異性核苷酸序列
特異性核苷酸序列
來進(jìn)行。PCR過程每次循環(huán)分為3步，其中溫度最低的一步是
復(fù)性
復(fù)性
。
（2）根據(jù)熒光探針功能分析，熒光探針中堿基序列的設(shè)計(jì)應(yīng)主要依據(jù)。在配制PCR擴(kuò)增液時(shí)，加入的熒光探針序列為5'-TTGCT……AGATT-3'，如果模板中存在N基因序列，與探針結(jié)合的序列應(yīng)該是5'-
新冠病毒的N基因的堿基序列—AATCT……AGCAA—
新冠病毒的N基因的堿基序列—AATCT……AGCAA—
-3'。如果某人沒有感染新冠病毒，則進(jìn)行PCR時(shí)DNA實(shí)時(shí)熒光信號(hào)強(qiáng)度
不變
不變
（填“增強(qiáng)”“減弱”或“不變”）。
（3）還可對(duì)新冠病毒進(jìn)行免疫學(xué)檢測(cè)，向小鼠體內(nèi)注射新冠病毒S蛋白（決定病毒入侵易感細(xì)胞的關(guān)鍵蛋白）后分離產(chǎn)生的B淋巴細(xì)胞，并與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合，常用的融合方法有
PEG融合/滅活病毒誘導(dǎo)融合法
PEG融合/滅活病毒誘導(dǎo)融合法
（答出1種）；再經(jīng)多次篩選、檢測(cè)，獲得雜交瘤細(xì)胞，該種細(xì)胞的特點(diǎn)是
既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生與S蛋白特異性結(jié)合的專一抗體
既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生與S蛋白特異性結(jié)合的專一抗體
。在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)，獲得大量可與S蛋白特異性結(jié)合的單克隆抗體作為診斷試劑。

【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定；單克隆抗體及其應(yīng)用．

【答案】逆轉(zhuǎn)錄酶；特異性核苷酸序列；復(fù)性；新冠病毒的N基因的堿基序列—AATCT……AGCAA—；不變；PEG融合/滅活病毒誘導(dǎo)融合法；既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生與S蛋白特異性結(jié)合的專一抗體

【解答】

【點(diǎn)評(píng)】

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發(fā)布：2024/7/31 8:0:9組卷：24引用：4難度：0.6

相似題

1．PCR是利用體內(nèi)DNA復(fù)制的原理，進(jìn)行生物體外復(fù)制特定 DNA片段的核酸合成技術(shù)。請(qǐng)回答有關(guān)問題：
（1）PCR反應(yīng)的基本步驟是變性、

、

。
（2）科學(xué)家研究發(fā)現(xiàn) DNA聚合酶只能催化

方向的聚合反應(yīng)。圖1表示細(xì)胞內(nèi)染色體 DNA的半保留復(fù)制過程，有一條子鏈?zhǔn)窍群铣啥痰腄NA片段（稱為岡崎片段），再形成較長(zhǎng)的分子，可推測(cè)參與以上過程的酶有DNA聚合酶、

、

。在PCR過程中無岡崎片段形成，原因是細(xì)胞內(nèi)染色體 DNA的復(fù)制過程特點(diǎn)是

，PCR過程的特點(diǎn)是

。
（3）雙脫氧核苷三磷酸（ddNTP）與脫氧核苷三磷酸（dNTP）的結(jié)構(gòu)如圖2所示。已知 ddNTP按堿基互補(bǔ)配對(duì)的方式加到正在復(fù)制的子鏈中后，子鏈的延伸立即終止?，F(xiàn)有一些序列為5'-GCCTAAGATCGCA-3'的DNA分子單鏈片段，通過PCR技術(shù)獲得以堿基“C”為末端（3'為堿基C）不同長(zhǎng)度的子鏈DNA片段，將以上子鏈 DNA片段進(jìn)行電泳分離可得到

種不同長(zhǎng)度的子鏈 DNA片段。為使實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行，在PCR反應(yīng)管中除了單鏈模板、引物、DNA 聚合酶和相應(yīng)的緩沖液等物質(zhì)外，還需要加入下列哪組原料

。
A.dGTP，dATP，dTTP
B.dGTP、dATP、dTTP、dCTP、ddCTP
C.dGTP，dATP，dTTP，dCTP
D.ddGTP，ddATP，ddTTP，ddCTP
（4）如圖3為形成單鏈DNA后，再進(jìn)行PCR擴(kuò)增示意圖。

催化①過程的酶是

；核酸酶H的作用是

。如果某RNA單鏈中一共有80個(gè)堿基，其中C有15個(gè)，A與U之和占該鏈堿基含量的40%，經(jīng)過以上若干過程后共獲得8個(gè)雙鏈 DNA，此過程中至少需加入G參與組成的核苷酸數(shù)量為

（以上過程不考慮引物）。
發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：19引用：1難度：0.7
解析
2．PCR是利用體內(nèi)DNA復(fù)制的原理，進(jìn)行生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)。請(qǐng)回答有關(guān)問題：

（1）PCR反應(yīng)的基本步驟是變性、復(fù)性、

。
（2）雙脫氧核苷三磷酸（ddNTP）與脫氧核苷三磷酸（dNTP）的結(jié)構(gòu)如圖2所示。已知ddNTP按堿基互補(bǔ)配對(duì)的方式加到正在復(fù)制的子鏈中后，子鏈的延伸立即終止?，F(xiàn)主有一些序列為5'-GCCTAAGATCGCA-3'的DNA分子單鏈片段，通過PCR技術(shù)獲得以堿基“C”為末端（3'為堿基C）不同長(zhǎng)度的子鏈DNA片段，將以上子鏈DNA片段進(jìn)行電泳分離可得到

種不同長(zhǎng)度的子鏈DNA片段。為使實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行，在PCR反應(yīng)管中除了單鏈模板、引物、DNA聚合酶和相應(yīng)的緩沖液等物質(zhì)外，還需要加入下列哪組原料

。
A．dGTP、dATP、dTTP
B．dGTR、dATP、dTTP、dCTP、ddCTP
C．dGTP、dATP、dTTP、dCTP
D．ddGTP、ddATP、ddTTP、ddCTP
（3）科學(xué)家研究發(fā)現(xiàn)DNA聚合酶只能催化

方向的聚合反應(yīng)。圖1表示細(xì)胞內(nèi)染色體DNA的復(fù)制過程，有一條子鏈?zhǔn)窍群铣啥痰腄NA片段（稱為岡崎片段），再形成較長(zhǎng)的分子，可推測(cè)參與以上過程的酶有DNA連接酶

、

。在PCR過程中無岡崎片段形成，原因是細(xì)胞內(nèi)染色體DNA的復(fù)制過程特點(diǎn)是

，PCR過程的特點(diǎn)是

。
發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：12引用：1難度：0.7
解析
3．Sanger法DNA測(cè)序技術(shù)的核心原理：由于雙脫氧核苷酸（ddNTP）的2'和3'都不含羥基，其在DNA的合成過程中不能形成磷酸二酯鍵，因此可以中斷DNA分子合成反應(yīng)。在四個(gè)含有4種脫氧核苷酸（dNTP）的DNA體外合成反應(yīng)體系中分別加入一定比例帶有放射性同位素標(biāo)記的ddNTP（分別為：ddATP，ddCTP，ddGTP和ddTTP），在PCR過程中復(fù)制隨機(jī)終止，產(chǎn)生四組不同長(zhǎng)度的一系列終止處帶有標(biāo)記的DNA片段。然后在變性凝膠（加入尿素等堿性物質(zhì)）上進(jìn)行電泳和放射自顯影后，可以根據(jù)電泳帶的位置確定待測(cè)分子的DNA序列，具體過程見圖。
注：ddA是ddATP的縮寫形式。

（1）如圖1中Ⅰ過程橫線①中應(yīng)該加入的物質(zhì)是

，dNTP中dATP與ATP在組成上的區(qū)別是

，為什么該過程中需要添加引物？
（2）材料中提到“在變性凝膠上進(jìn)行電泳……”，請(qǐng)解釋“變性”

，為什么要變性處理？

。
（3）如果電泳結(jié)果如圖2所示，請(qǐng)寫出待測(cè)DNA分子的序列

。
（4）某同學(xué)要通過PCR技術(shù)獲得被³²P標(biāo)記且以堿基“C”為末端、不同長(zhǎng)度的子鏈DNA片段，在反應(yīng)管中已經(jīng)有模板、引物、酶和相應(yīng)緩沖液等等，還需加入哪些原料

。
發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：16引用：1難度：0.7
解析

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