干擾素是一種具有干擾病毒復(fù)制作用的糖蛋白,廣泛用于病毒感染、癌癥等疾病的治療,某科研小組利用基因工程技術(shù)培育的產(chǎn)干擾素轉(zhuǎn)基因奶牛,利用奶牛乳腺生物發(fā)生器,批量獲得干擾素。
(1)已知DNA鏈的合成方向是5′→3′,若要通過PCR擴增出人的干擾素基因,應(yīng)該選擇的引物是 引物2和引物3引物2和引物3。
(2)若用BamHⅠ和EcoRⅠ聯(lián)合酶切割目的基因和質(zhì)粒構(gòu)建的基因表達載體,成功導(dǎo)入受體細胞后幾乎全部細胞都能正常表達基因產(chǎn)物,而僅用EcoRⅠ處理目的基因和質(zhì)粒構(gòu)建的基因表達載體,經(jīng)培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)約50%的細胞能正常表達目的基因產(chǎn)物,主要原因是 只用一種限制酶,存在正接和反接只用一種限制酶,存在正接和反接。
(3)根據(jù)圖2質(zhì)粒結(jié)構(gòu),可將受體細胞置于含氨芐青霉素氨芐青霉素的培養(yǎng)基中篩選出載體成功轉(zhuǎn)入的細胞。
(4)轉(zhuǎn)基因奶牛培育成功標志是 牛奶中能檢測含有干擾素牛奶中能檢測含有干擾素。
(5)該科研小組發(fā)現(xiàn)利用基因工程技術(shù)培育的產(chǎn)干擾素的乳腺生物反應(yīng)器的奶牛經(jīng)常感染布魯氏菌病結(jié)核病,故征集培育出肺部細胞可產(chǎn)乳鐵蛋白肽(一種抗菌多肽)且乳汁中含干擾素的雙轉(zhuǎn)基因奶牛新品種的方案,某同學(xué)設(shè)計了圖3的基因表達載體,該方案被科研小組否定,原因主要是 兩個基因用一個啟動子無法實現(xiàn)在不同細胞分別表達兩個基因用一個啟動子無法實現(xiàn)在不同細胞分別表達。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】引物2和引物3;只用一種限制酶,存在正接和反接;氨芐青霉素;牛奶中能檢測含有干擾素;兩個基因用一個啟動子無法實現(xiàn)在不同細胞分別表達
【解答】
【點評】
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