玉米葉片細胞含有一種由X基因編碼的水通道蛋白X,在植物生長發(fā)育過程中對水分的吸收具有重要的調節(jié)功能。為了探究X蛋白的超量表達對玉米生長的影響,科研人員進行了超量表達X蛋白轉基因玉米的生理特性等研究。在超量表達X基因載體的構建中,所用DNA片段和Ti質粒的酶切位點如圖1所示?;卮鹣铝袉栴}:
(1)強啟動子是一段有特殊結構的DNA片段,能被RNA聚合酶RNA聚合酶識別并結合,驅動基因的持續(xù)轉錄。為使X基因在玉米植株中超量表達,應優(yōu)先選用BamHⅠ和SacⅠBamHⅠ和SacⅠ酶組合,將目的基因片段和Ti質粒切開后構建重組表達載體。T-DNA在該實驗中的作用是將強啟動子和X基因帶人玉米細胞并整合到玉米細胞染色體DNA上將強啟動子和X基因帶人玉米細胞并整合到玉米細胞染色體DNA上。
(2)將農(nóng)桿菌浸泡過的玉米愈傷組織進行植物組織培養(yǎng),培養(yǎng)基中需加入潮霉素潮霉素進行篩選,篩選出的愈傷組織經(jīng)過細胞分化細胞分化形成叢芽,最終獲得多個轉基因玉米株系。
(3)X蛋白在玉米株系的表達量如圖2所示。據(jù)圖分析,研究超量表達X蛋白轉基因玉米的生理特性時,宜選擇玉米株系a1~a4中的a1、a3a1、a3作為實驗材料,理由是X蛋白表達量顯著高于野生型X蛋白表達量顯著高于野生型。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】RNA聚合酶;BamHⅠ和SacⅠ;將強啟動子和X基因帶人玉米細胞并整合到玉米細胞染色體DNA上;潮霉素;細胞分化;a1、a3;X蛋白表達量顯著高于野生型
【解答】
【點評】
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