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Rag2基因缺失小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細(xì)胞.科研人員利用胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)對(duì)Rag2基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療.其技術(shù)流程如圖:

(1)步驟①中所選的卵母細(xì)胞應(yīng)處于
減數(shù)第二次分裂中(MⅡ中)
減數(shù)第二次分裂中(MⅡ中)
期.
(2)步驟②中,重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時(shí),可從其
內(nèi)細(xì)胞團(tuán)
內(nèi)細(xì)胞團(tuán)
分離出ES細(xì)胞,ES細(xì)胞在形態(tài)上表現(xiàn)為
體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯
體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯
的特點(diǎn).
(3)步驟③中,需要構(gòu)建含有Rag2基因的
表達(dá)載體(重組質(zhì)粒)
表達(dá)載體(重組質(zhì)粒)
.可以根據(jù)Rag2基因的核苷酸序列設(shè)計(jì)合成
引物
引物
,利用
PCR
PCR
技術(shù)擴(kuò)增Rag2基因片段.用HindⅢ和PstⅠ限制酶分別在目的基因所在DNA片段兩側(cè)進(jìn)行酶切獲得Rag2基因片段.為將該片段直接連接到表達(dá)載體,所選擇的表達(dá)載體上應(yīng)具有
HindⅢ和PstⅠ
HindⅢ和PstⅠ
酶的酶切位點(diǎn).

【答案】減數(shù)第二次分裂中(MⅡ中);內(nèi)細(xì)胞團(tuán);體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯;表達(dá)載體(重組質(zhì)粒);引物;PCR;HindⅢ和PstⅠ
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:76引用:3難度:0.1
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  • 1.下列有關(guān)干細(xì)胞培養(yǎng)及應(yīng)用的說(shuō)法錯(cuò)誤的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/12/30 22:30:1組卷:6引用:2難度:0.7
  • 2.下列關(guān)于干細(xì)胞的敘述中,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/12/31 0:0:1組卷:8引用:8難度:0.7
  • 3.胚胎干細(xì)胞是從哺乳動(dòng)物或人的早期胚胎中分離出來(lái)的一類細(xì)胞,具有發(fā)育的全能性,它可進(jìn)一步分化發(fā)育成各種不同的組織細(xì)胞.如圖所示為干細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程,請(qǐng)問(wèn)圖中哪一段的細(xì)胞是干細(xì)胞( ?。?br />

    發(fā)布:2024/12/27 8:0:2組卷:11引用:4難度:0.7
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