腫瘤細(xì)胞可以表達(dá)CD47蛋白，并與吞噬細(xì)胞表面的信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白a（SIRPa）結(jié)合，向吞噬細(xì)胞發(fā)出“別吃我”的信號(hào)，以逃脫機(jī)體免疫系統(tǒng)的攻擊。因此阻斷CD47/SIRPa信號(hào)，有望恢復(fù)吞噬細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的春噬作用。請(qǐng)回答有關(guān)問(wèn)題
（1）利用外源DNA、質(zhì)粒制備含CD47基因的重組質(zhì)粒。圖1為含CD47基因的外源DNA、質(zhì)粒的有關(guān)信息，EcoRⅠ、BamHⅠ、SalⅠ、XhoⅠ均為限制酶，Kan′、Tc′分別為卡那霉素抗性基因、四環(huán)素抗性基因。
①為了形成合適的重組質(zhì)粒，應(yīng)該選用 BamHI和XhoIBamHI和XhoI限制酶切割外源DNA和質(zhì)粒DNA。
②重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞的成功率很低，需經(jīng)篩選才能獲得導(dǎo)入成功的受體細(xì)胞。結(jié)合圖1所獲得的重組質(zhì)粒分析，所選受體細(xì)胞應(yīng)具備 能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)而不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)而不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)條件。
（2）圖2是利用上述基因工程獲得CD47蛋白的制備相應(yīng)單克隆抗體及實(shí)驗(yàn)過(guò)程。
①圖2中a操作是要獲得 已免疫的B淋巴細(xì)胞已免疫的B淋巴細(xì)胞。
②圖2中過(guò)程b可以體現(xiàn)細(xì)胞膜的 流動(dòng)性流動(dòng)性結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。
③圖2中“篩選”一般需要 22種方法，目的是 篩選出既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生抗CD47蛋白抗體的雜交瘤細(xì)胞篩選出既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生抗CD47蛋白抗體的雜交瘤細(xì)胞。
④一般來(lái)說(shuō)，圖2中細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足相應(yīng)的氣體環(huán)境是 含有95%的空氣加5%CO2的混合氣體含有95%的空氣加5%CO2的混合氣體，目的是 為細(xì)胞代謝提供氧氣、維持培養(yǎng)液的pH為細(xì)胞代謝提供氧氣、維持培養(yǎng)液的pH。
⑤圖2中共同培養(yǎng)吞噬細(xì)胞和癌細(xì)胞，在實(shí)驗(yàn)組加入不同濃度的抗CD47抗體，測(cè)定吞細(xì)胞的吞噬指數(shù)（吞噬指數(shù)與吞噬癌細(xì)胞所吞噬的腫瘤細(xì)胞數(shù)量成正相關(guān)），實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖3示。該實(shí)驗(yàn)結(jié)果對(duì)臨床試驗(yàn)有何指導(dǎo)意義？使用抗CD47抗體治療腫瘤需要嚴(yán)格控制抗體的濃度使用抗CD47抗體治療腫瘤需要嚴(yán)格控制抗體的濃度。
【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用．
【答案】BamHI和XhoI；能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)而不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)；已免疫的B淋巴細(xì)胞；流動(dòng)性；2；篩選出既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生抗CD47蛋白抗體的雜交瘤細(xì)胞；含有95%的空氣加5%CO2的混合氣體；為細(xì)胞代謝提供氧氣、維持培養(yǎng)液的pH；使用抗CD47抗體治療腫瘤需要嚴(yán)格控制抗體的濃度
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：27引用：1難度：0.6
相似題
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1．CD47是一種跨膜糖蛋白，它可與巨噬細(xì)胞表面的信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合，從而抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞高1.6～5倍，導(dǎo)致吞噬細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱。科學(xué)家推測(cè)，抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用，為此他們按照如圖流程進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。下列敘述正確的是（ ?。?br />
發(fā)布：2024/12/31 1:30:1組卷：7引用：3難度：0.6 -
2．雙特異性抗體是指一個(gè)抗體分子可以與兩個(gè)不同抗原或同一抗原的兩個(gè)不同抗原表位相結(jié)合，目前最常利用雜交瘤雜交法來(lái)制備。長(zhǎng)春花是原產(chǎn)于非洲東海岸的野生花卉，其所含的長(zhǎng)春堿具有良好的抗腫瘤作用。圖1是某雙特異性抗體作用圖。圖2是科研人員通過(guò)雜交—雜交瘤細(xì)胞技術(shù)（免疫的B淋巴細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞雜交技術(shù)）生產(chǎn)能同時(shí)識(shí)別癌胚抗原和長(zhǎng)春堿的雙特異性單克隆抗體的部分過(guò)程。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題：
（1）與植物體細(xì)胞雜交相比，圖2中過(guò)程②特有的誘導(dǎo)融合的方法是，過(guò)程②選用的骨髓瘤細(xì)胞（選填“能”或“不能”）在HAT培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。
（2）對(duì)③篩選出的雜交瘤細(xì)胞，還需進(jìn)行和，才能篩選出足夠量的既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。與傳統(tǒng)血清抗體相比，單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)是（答出一點(diǎn)）。
（3）圖2中①步驟注射癌胚抗原的目的是。圖2方框內(nèi)需要經(jīng)過(guò)次篩選，才能獲取單克隆雜交—雜交瘤細(xì)胞。體外培養(yǎng)到一定時(shí)期的單克隆雜交—雜交瘤細(xì)胞會(huì)因?yàn)?、有害代謝物的積累和培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)缺乏等因素而分裂受阻，需進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
（4）與直接使用長(zhǎng)春堿相比，將長(zhǎng)春堿與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥，對(duì)人體的副作用更小，原因是。發(fā)布：2024/12/31 1:30:1組卷：21引用：4難度：0.5 -
3．使用高效的細(xì)胞毒素藥物進(jìn)行化療可以有效殺傷腫瘤細(xì)胞但細(xì)胞毒素沒(méi)有特異性，在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)還會(huì)對(duì)健康細(xì)胞造成傷害。這限制了它在臨床上的應(yīng)用。抗體一藥物偶聯(lián)物（ADC）通過(guò)將細(xì)胞毒素與能特異性識(shí)別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合，實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷ADC通常由抗體、接頭和藥物（如細(xì)胞毒素）三部分組成，它的作用機(jī)制如圖所示。下列敘述正確的是（ ?。?br />
發(fā)布：2024/12/31 3:30:1組卷：18引用：2難度：0.7
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