組織型纖溶酶原激活劑（tPA）是體內(nèi)纖溶系統(tǒng)的生理性激動劑，也是一種新型的血栓溶解劑。生長激素（GH）可促進(jìn)動物細(xì)胞增殖和乳腺生長發(fā)育及維持泌乳，在動物遺傳育種領(lǐng)域具有重要的功能。研究人員將GH基因?qū)朕D(zhuǎn)tPA基因小鼠體內(nèi)，獲得雙轉(zhuǎn)基因小鼠，以期提高小鼠乳汁中的tPA表達(dá)量?；卮鹣铝袉栴}：
（1）首先構(gòu)建GH基因的表達(dá)載體，如圖所示：

GH基因上游的CMV能被

RNA聚合酶

RNA聚合酶

識別并結(jié)合，從而開啟轉(zhuǎn)錄過程；若GH基因是通過反轉(zhuǎn)錄得到的，則其與原基因的差異在于編碼區(qū)不包含

內(nèi)含子

內(nèi)含子

序列。
（2）對卵細(xì)胞供體和受體小鼠進(jìn)行同期發(fā)情處理，還要給供體小鼠注射

促性腺激素

促性腺激素

，以 促進(jìn)其超數(shù)排卵，然后與轉(zhuǎn)tPA基因公鼠交配。供體小鼠受精后，處死小鼠，獲取受精卵，將GH基因表達(dá)載體用

顯微注射

顯微注射

法導(dǎo)入受精卵中。將轉(zhuǎn)基因受精卵轉(zhuǎn)移至受體小鼠體內(nèi)，待仔鼠出生。
（3）若要測定GH基因是否成功導(dǎo)入小鼠細(xì)胞核，取仔鼠的

尾部

尾部

（填“骨髓”“乳腺”或“尾部”）細(xì)胞檢測更加方便；若要對GH基因和tPA基因進(jìn)行PCR擴(kuò)增，需提取細(xì)胞基因組DNA，并設(shè)計

4

4

種引物。
（4）雙轉(zhuǎn)基因小鼠長大后，選取健康個體，使其交配產(chǎn)仔后，收集其

乳汁

乳汁

測定其中的tPA蛋白含量。若要觀察GH基因是否促進(jìn)了tPA基因的表達(dá)，還需測定

只轉(zhuǎn)tPA基因

只轉(zhuǎn)tPA基因

小鼠的tPA蛋白含量。