在乙肝病毒(HBV)的結(jié)構(gòu)蛋白中,用來制備疫苗的主要是HBsAg蛋白。目前HBsAg基因已在生物體系中成功表達(dá)。如圖1表示用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育轉(zhuǎn)基因番茄,生產(chǎn)乙肝疫苗的技術(shù)路線,請(qǐng)回答:
(1)利用PCR技術(shù)獲取HBsAg基因片段時(shí),需要用到 耐高溫的DNA聚合耐高溫的DNA聚合酶,還需要根據(jù)HBsAg基因的序列合成下列四種引物中的 BCBC(填字母)。
(2)基因工程的核心步驟是 構(gòu)建基因表達(dá)載體構(gòu)建基因表達(dá)載體。圖1中過程①需要用到的限制酶是 HindⅢ和XhoⅠHindⅢ和XhoⅠ,這樣可以保證 HBsAg基因和質(zhì)粒的正確連接HBsAg基因和質(zhì)粒的正確連接。
(3)利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將轉(zhuǎn)基因番茄細(xì)胞培育成試管苗的過程中,培養(yǎng)基中需要加入 生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素以誘導(dǎo)番茄細(xì)胞脫分化和再分化,還需要加入 卡那霉素卡那霉素以篩選出導(dǎo)入了HBsAg基因的受體細(xì)胞。用該植株結(jié)出的番茄果實(shí)飼喂小鼠,若在小鼠的血清中檢測(cè)到 抗乙肝病毒的抗體抗乙肝病毒的抗體,則說明該轉(zhuǎn)基因乙肝疫苗口服時(shí)有效。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合;植物的組織培養(yǎng).
【答案】耐高溫的DNA聚合;BC;構(gòu)建基因表達(dá)載體;HindⅢ和XhoⅠ;HBsAg基因和質(zhì)粒的正確連接;生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素;卡那霉素;抗乙肝病毒的抗體
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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