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2022-2023學(xué)年浙江省臺州市高二(下)期末生物試卷
>
試題詳情
糖尿病是全球患病率最高的慢性病之一,胰島素是最主要的治療藥物,需求量非常大。研究者利用圖中質(zhì)粒構(gòu)建重組DNA分子并導(dǎo)入大腸桿菌,獲得生產(chǎn)胰島素的工程菌
注:EcoRⅠ、BamHⅠ、SmaⅠ為不同的限制酶,LacZ基因能編碼產(chǎn)生β-半乳糖苷酶,可催化無色物質(zhì)X-gal 產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)使菌落呈藍(lán)色,否則為白色,以顏色不同為依據(jù)直接篩選含重組DNA分子菌體的方法稱為“藍(lán)白斑”法。
回答下列問題:
(1)獲取目的基因。提取胰島β細(xì)胞中的總RNA,通過一定方法分離純化出mRNA,經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄得到
cDNA
cDNA
然后設(shè)計引物利用PCR擴(kuò)增胰島素基因。選擇胰島β細(xì)胞提取RNA的原因是
胰島β細(xì)胞選擇性表達(dá)胰島素基因
胰島β細(xì)胞選擇性表達(dá)胰島素基因
。
(2)構(gòu)建重組DNA分子。為使所得的胰島素基因能按照正確的方向與載體連接,利用PCR 擴(kuò)增目的基因時,在目的基因的左右端分別添加
SmaⅠ、BamHⅠ
SmaⅠ、BamHⅠ
限制酶的識別序列,且識別序列應(yīng)添加在引物的
5'
5'
(填“3′”或“5′”)端。
(3)導(dǎo)入、篩選和鑒定。
①將大腸桿菌放在低溫、低濃度的CaCl
2
溶液中,使
細(xì)胞膜
細(xì)胞膜
的通透性改變,成為感受態(tài)細(xì)胞,提高轉(zhuǎn)化效率。
②“藍(lán)白斑”法是基因工程中常用的篩選方法。為了達(dá)到篩選目的,根據(jù)所用載體質(zhì)粒的遺傳特性,受體大腸桿菌需具備
氨芐青霉素
氨芐青霉素
敏感和
β-半乳糖苷酶
β-半乳糖苷酶
缺陷等特征。篩選時,將轉(zhuǎn)化后的菌液經(jīng)稀釋后用涂布分離法接種于含
氨芐青霉素和X-gal
氨芐青霉素和X-gal
的培養(yǎng)基,經(jīng)培養(yǎng)后挑取白色的單菌落,即為目標(biāo)工程菌。
③為更加精準(zhǔn)地鑒定受體細(xì)胞中是否轉(zhuǎn)入目的基因,可采用
核酸分子雜交
核酸分子雜交
和PCR等方法,PCR 后可用凝膠電泳鑒定PCR產(chǎn)物。下列屬于影響DNA遷移速率因素的是
ABCD
ABCD
(A.DNA 分子大小 B.DNA分子形狀 C.所帶電荷情況 D.凝膠濃度)
(4)驗(yàn)證胰島素功能。為驗(yàn)證胰島素的降血糖功能,某生物小組以小鼠的活動狀況為觀測指標(biāo)設(shè)計實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)材料:正常小鼠若干、注射器、胰島素溶液、葡萄糖溶液、生理鹽水等
請完善實(shí)驗(yàn)步驟:
①給每只生理狀況相似的正常小鼠
注射等量適量的胰島素溶液
注射等量適量的胰島素溶液
,觀察并記錄小鼠的活動狀況。
②等小鼠出現(xiàn)活動減少、甚至昏迷等
低血糖
低血糖
癥狀,將小鼠隨機(jī)均分為A、B兩組。
③A組小鼠
注射等量適量葡萄糖溶液
注射等量適量葡萄糖溶液
,B組小鼠
注射等量生理鹽水
注射等量生理鹽水
,一段時間后,觀察小鼠活動狀況。
結(jié)果及結(jié)論:A組小鼠癥狀得到緩解,B組小鼠狀況無變化,證明胰島素具降血糖功能。
【考點(diǎn)】
基因工程的操作過程綜合
.
【答案】
cDNA;胰島β細(xì)胞選擇性表達(dá)胰島素基因;SmaⅠ、BamHⅠ;5';細(xì)胞膜;氨芐青霉素;β-半乳糖苷酶;氨芐青霉素和X-gal;核酸分子雜交;ABCD;注射等量適量的胰島素溶液;低血糖;注射等量適量葡萄糖溶液;注射等量生理鹽水
【解答】
【點(diǎn)評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
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發(fā)布:2024/7/27 8:0:9
組卷:9
引用:2
難度:0.5
相似題
1.
目前,科學(xué)家已在牛和山羊等動物乳腺生物反應(yīng)器中表達(dá)出了抗凝血酶、血清白蛋白等多種蛋白類藥物.下列與之相關(guān)的說法,正確的是( )
A.可以將目的基因直接導(dǎo)入受體細(xì)胞
B.實(shí)驗(yàn)過程中采用顯微注射的方法導(dǎo)入目的基因
C.檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄的方法是抗原-抗體雜交
D.目的基因只存在于動物的乳腺細(xì)胞中
發(fā)布:2024/10/26 17:0:2
組卷:5
引用:1
難度:0.9
解析
2.
最近,科學(xué)家培育出一種轉(zhuǎn)基因小鼠,其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長激素并將其分泌到尿液中.這是繼哺乳動物乳腺生物反應(yīng)器研發(fā)成功后,在膀胱生物反應(yīng)器研究上另一進(jìn)展.
(1)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫荏w細(xì)胞,常用的方法是
.所使用到儀器是
.
(2)在基因工程中,將目的基因與運(yùn)載體結(jié)合時,必須用
酶和
酶.常用的運(yùn)載體有
、
、
等,而作為運(yùn)載體必須具備相應(yīng)的條件,例如應(yīng)具有
以便進(jìn)行篩選.進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移時,通常要將外源基因轉(zhuǎn)入動物的
中,原因是
.
(3)通常采用
技術(shù)檢測外源基因是否插入了小鼠的基因組中.
(4)在研究膀胱生物反應(yīng)器時,應(yīng)使外源基因在小鼠的
細(xì)胞中特異性表達(dá).
(5)如果將藥物蛋白基因轉(zhuǎn)入動物如牛、羊的膀胱上皮細(xì)胞中,從轉(zhuǎn)基因牛、羊尿液中提取藥物比從乳汁中提取藥物的更大優(yōu)越性在于
.
發(fā)布:2024/10/26 17:0:2
組卷:3
引用:1
難度:0.3
解析
3.
抗凝血酶是一種天然抗凝血劑,在臨床上被廣泛應(yīng)用。目前科學(xué)家已在豬和羊等動物的乳腺生物反應(yīng)器中表達(dá)出了人的抗凝血酶,如圖是構(gòu)建抗凝血酶基因表達(dá)載體所用的pBR質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)及人抗凝血酶基因所在的DNA片段,回答下列問題:
(1)現(xiàn)有以下4種引物,引物A15'-GGACCCCGGG-3';引物B:5'-CATTTCTAGA-3';引物C:5'-CCTGGGGCCC-3';引物D:5'-GTAAAGATCT-3';,利用PCR擴(kuò)增獲取抗凝血酶基因,應(yīng)選用引物
(填引物名稱),擴(kuò)增產(chǎn)物可選擇限制酶
切割后再利用E?coliDNA連接酶連接到pBR質(zhì)粒上。
(2)所選用的pBR質(zhì)粒上含有啟動子,其作用是
,將構(gòu)建的基因表達(dá)載體先導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞,然后將大腸桿菌涂布到含新霉素的選擇培養(yǎng)基上,長出了多個大腸桿菌菌落,這些菌落并非都是目的菌株,原因是
。
(3)將篩選得到的目的菌株提取質(zhì)粒,再通過
方法導(dǎo)入到豬或羊的
細(xì)胞內(nèi),通過培養(yǎng)即可獲得能表達(dá)人抗凝血酶的乳腺生物反應(yīng)器。
發(fā)布:2024/10/26 17:0:2
組卷:4
引用:1
難度:0.6
解析
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