泡膜運輸是介導真核細胞蛋白質分泌途徑的主要方式??茖W家已經成功鑒定出三種運輸小泡:網格蛋白有被小泡,COPⅠ有被小泡和COPⅡ有被小泡。其中COPⅠ有被小泡上的ε-COP蛋白在高爾基體內部以及高爾基體與內質網之間的蛋白質運輸中發(fā)揮了關鍵作用。科學家通過一定的技術手段,制備了水稻ε-COP蛋白的單克隆抗體。
(1)利用PCR技術擴增水稻ε-COP蛋白基因,PCR反應需在一定的緩沖溶液中才能進行,主要成分包括:DNA模板、2種引物2種引物,4種脫氧核苷酸和TaqDNA聚合酶TaqDNA聚合酶。
(2)研究人員通過一定的技術手段,將ε-COP蛋白基因與運載體結合,得到如圖所示重組表達載體,據圖分析:
①該重組表達載體用到的限制酶是BamHI和XhoIBamHI和XhoI。研究人員將其導入大腸桿菌常用方法是CaCl2轉化法CaCl2轉化法。
②接下來研究人員將轉化后的大腸桿菌接種在含有氨芐青霉素(Amp)氨芐青霉素(Amp)的培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時間,長出的菌落即為轉化成功的大腸桿菌。
③研究人員以大腸桿菌作為受體細胞,相對酵母菌而言,具有結構簡單、繁殖快、易培養(yǎng)、遺傳物質相對較少、外源蛋白表達量高結構簡單、繁殖快、易培養(yǎng)、遺傳物質相對較少、外源蛋白表達量高(答出兩點即可)等優(yōu)點。
(3)利用聚丙烯酰胺凝膠電泳將重組水稻ε-COP蛋白提純后,取適量重組蛋白分多次皮下注射家兔,10天后大量采血收集抗血清。注射的重組蛋白相當于抗原抗原,多次注射的目的是:產生大量的漿細胞,分泌更多抗體產生大量的漿細胞,分泌更多抗體。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】2種引物;TaqDNA聚合酶;BamHI和XhoI;CaCl2轉化法;氨芐青霉素(Amp);結構簡單、繁殖快、易培養(yǎng)、遺傳物質相對較少、外源蛋白表達量高;抗原;產生大量的漿細胞,分泌更多抗體
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權屬菁優(yōu)網所有,未經書面同意,不得復制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:12引用:1難度:0.7
相似題
-
1.下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是( ?。?/h2>
發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7 -
2.幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分,幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內,可增強其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:
(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括
(2)生物體細胞內的DNA復制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
(3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
(4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
(5)若獲得的轉基因植株(幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據中心法則分析,其可能的原因是發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6 -
3.下列有關基因工程的敘述,正確的是( ?。?/h2>
發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
相關試卷