細菌的每一個質粒都是復制子，作為一個復制單位，至少要有一個復制起點，即ori位點。將ori區(qū)克隆到一個不能自主復制的環(huán)狀雙鏈DNA分子上，并引入到原核細胞后，該重組DNA具有自主復制能力。如質粒pBR322，它包含以下幾個部分的DNA：①來源于pMB1質粒的復制起點（ori）及rop區(qū)；②來源于質粒pSC101的四環(huán)素抗性基因（tetr）；③來源于轉座子Tn3的氨芐青霉素抗性基因（ampr）?？茖W家計劃將人胰島素基因轉入大腸桿菌中作為生物反應器來大量生產(chǎn)人胰島素，它們先將人胰島素基因處理后獲得以下片段，再與質粒pBR322構建基因表達載體。
（1）圖中所示的目的基因不能直接從基因組文庫中獲得，原因是 圖中所示胰島素基因的編目區(qū)是連續(xù)的，而人體（真核生物）細胞中基因的編碼區(qū)是不連續(xù)的圖中所示胰島素基因的編目區(qū)是連續(xù)的，而人體（真核生物）細胞中基因的編碼區(qū)是不連續(xù)的，處理思路是 以真核生物胰島B細胞中胰島素轉錄的成熟mRNA為模板，逆轉錄獲得對應的cDNA以真核生物胰島B細胞中胰島素轉錄的成熟mRNA為模板，逆轉錄獲得對應的cDNA。
（2）可以選擇 PvuⅡ和SalⅠPvuⅡ和SalⅠ（填限制酶）進行處理，最終獲得含有目的基因的高拷貝數(shù)質粒。
（3）研究發(fā)現(xiàn)，作為受體細胞的大腸桿菌細胞內本來就存在圖3所示的質粒，且構建的基因表達載體中，既存在重組質粒、也存在普通質粒（pBR322）。為了更好地篩選出成功導入了重組質粒的細胞，研究人員計劃使用影印法：將導入質粒的細胞接種在完全培養(yǎng)基中，待菌落長出后將培養(yǎng)皿倒置于包有滅菌絲絨布的木質圓柱印章上，使其沾上來自平板上的菌落。然后可把這一“印章”上的菌落分別接種到不同的選擇培養(yǎng)基平板上（圖4）。
應選擇 SalⅠ和BamHⅠSalⅠ和BamHⅠ（填限制酶）進行處理，培養(yǎng)基A、B中分別添加 氨芐青霉素氨芐青霉素、四環(huán)素四環(huán)素（填抗生素），導入重組質粒的細胞是 1、31、3（填序號）。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】圖中所示胰島素基因的編目區(qū)是連續(xù)的，而人體（真核生物）細胞中基因的編碼區(qū)是不連續(xù)的；以真核生物胰島B細胞中胰島素轉錄的成熟mRNA為模板，逆轉錄獲得對應的cDNA；PvuⅡ和SalⅠ；SalⅠ和BamHⅠ；氨芐青霉素；四環(huán)素；1、3
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復制發(fā)布。
發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：14引用：1難度：0.5
相似題
-
1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6