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為了從動(dòng)物組織中提取純凈的DNA,首先要快速、有效地消化裂解動(dòng)物組織細(xì)胞。消化裂解動(dòng)物組織常用的方法有蛋白酶(如蛋白酶K)水解、表面活性劑處理、變性劑處理等。某科研人員擬使用加酶洗衣粉消化裂解豬肌肉樣本,并提取豬的DNA.實(shí)驗(yàn)步驟如下:
①取500mg剪碎的豬肌肉組織于離心管中,加40mg加酶洗衣粉和1.5mL超純水混合,在一定溫度條件下水浴消化24h。
②加入苯酚、氯仿、異丙醇(25:24:1)混合液抽提。
③加0.2mg/mL的RNA水解酶于37℃水浴。
④加酸酸鈉和無水乙醇,4000r/min高速離心15min。
⑤用70%乙醇洗滌沉淀兩次,風(fēng)干,得到高純度的DNA。
請回答有關(guān)問題:
(1)加酶洗衣粉可以消化裂解動(dòng)物組織細(xì)胞的原理是
洗衣粉中蛋白酶和表面活性劑等可以破壞細(xì)胞膜
洗衣粉中蛋白酶和表面活性劑等可以破壞細(xì)胞膜
。
(2)步驟②的目的是
使蛋白質(zhì)變性,抽提蛋白質(zhì)
使蛋白質(zhì)變性,抽提蛋白質(zhì)
。步驟③的目的是
水解RNA
水解RNA
。
(3)步驟④中使用無水乙醇的目的是
析出DNA,提取含雜質(zhì)較少的DNA
析出DNA,提取含雜質(zhì)較少的DNA
,高速離心時(shí)溫度保持在4℃的原因有
降低核酸水解酶的活性,防止DNA降解;降低分子運(yùn)動(dòng),易于形成沉淀析出(增加DNA分子的柔韌性,減少斷裂)
降低核酸水解酶的活性,防止DNA降解;降低分子運(yùn)動(dòng),易于形成沉淀析出(增加DNA分子的柔韌性,減少斷裂)
。
(4)若是從血細(xì)胞中提取DNA,則選擇
雞血
雞血
(選填“雞血”或“哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞”)。破碎細(xì)胞時(shí),向血細(xì)胞液中加入一定量的
蒸餾水
蒸餾水
,同時(shí)用玻璃棒攪拌,過濾后收集濾液即可。

【考點(diǎn)】酶的特性及應(yīng)用
【答案】洗衣粉中蛋白酶和表面活性劑等可以破壞細(xì)胞膜;使蛋白質(zhì)變性,抽提蛋白質(zhì);水解RNA;析出DNA,提取含雜質(zhì)較少的DNA;降低核酸水解酶的活性,防止DNA降解;降低分子運(yùn)動(dòng),易于形成沉淀析出(增加DNA分子的柔韌性,減少斷裂);雞血;蒸餾水
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:13引用:2難度:0.6
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